| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一部分 DHA对野百合碱诱导肺高压大鼠血流动力学,右心指数的及阻力性肺动脉中膜影响 | 第17-30页 |
| 1. 前言 | 第17-21页 |
| 1.1 DHA的分子生物学特性 | 第19-20页 |
| 1.2 DHA在肺血管疾病中的作用 | 第20-21页 |
| 2. 材料 | 第21-23页 |
| 2.1 仪器 | 第21页 |
| 2.2 试剂及材料 | 第21-22页 |
| 2.3 实验动物 | 第22-23页 |
| 2.4 主要溶液及成分 | 第23页 |
| 3. 方法 | 第23-26页 |
| 3.1 实验动物分组及肺动脉高压模型制备 | 第23页 |
| 3.2 右心导管法测平均肺动脉压力 | 第23-24页 |
| 3.3 右心肥厚指数测定 | 第24页 |
| 3.4 肺组织病理取材 | 第24页 |
| 3.5 标本处理 | 第24-25页 |
| 3.6 免疫组化染色 | 第25-26页 |
| 3.7 统计学分析 | 第26页 |
| 4. 结果 | 第26-28页 |
| 4.1 DHA对大鼠平均肺动脉压力及右心指数的影响 | 第26-27页 |
| 4.2 DHA对大鼠阻力性肺动脉中膜的影响 | 第27-28页 |
| 5. 讨论 | 第28-29页 |
| 小结 | 第29-30页 |
| 第二部分 DHA对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠炎症反应及内质网应激的影响 | 第30-58页 |
| 1 前言 | 第30-36页 |
| 1.1 免疫炎症在肺高压疾病中的作用 | 第30-31页 |
| 1.2 不饱和脂肪酸在炎症性肺部疾病中的作用 | 第31-34页 |
| 1.2.1 不饱和脂肪酸与急性呼吸窘迫综合征 | 第31-32页 |
| 1.2.2 不饱和脂肪酸与支气管哮喘 | 第32-33页 |
| 1.2.3 不饱和脂肪酸与慢性阻塞性肺疾病 | 第33页 |
| 1.2.4 不饱和脂肪酸与肺囊性纤维化 | 第33-34页 |
| 1.3 内质网应激参与肺高压疾病发生发展 | 第34-35页 |
| 1.4 DHA与内质网应激 | 第35-36页 |
| 2 材料 | 第36-39页 |
| 2.1 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 试剂及材料 | 第37-39页 |
| 2.3 实验动物 | 第39页 |
| 3 方法 | 第39-47页 |
| 3.1 实验动物分组及模型建造 | 第39页 |
| 3.2 病理取材及标本准备 | 第39-40页 |
| 3.3 免疫组化 | 第40页 |
| 3.4 免疫荧光双染 | 第40页 |
| 3.5 大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及细胞分组 | 第40-41页 |
| 3.6 平滑肌细胞鉴定 | 第41页 |
| 3.7 实时定量PCR检测相关基因表达 | 第41-44页 |
| 3.8 Western blot | 第44-47页 |
| 3.9 统计分析 | 第47页 |
| 4 结果 | 第47-55页 |
| 4.1 DHA对大鼠肺组织MCP-1,IL-1β,TNF-和IL-6基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 4.2 DHA对大鼠肺组织炎症细胞浸润的影响 | 第48-51页 |
| 4.3 大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及鉴定 | 第51-52页 |
| 4.4 DHA对野百合碱诱导肺高压大鼠肺组织内质网应激相关标志物表达的影响 | 第52-53页 |
| 4.5 DHA对肺动脉平滑肌细胞内质网应激相关标志物表达的影响 | 第53-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 第三部分 DHA对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖影响及其机制 | 第58-74页 |
| 1 前言 | 第58-61页 |
| 1.1 DHA与血管平滑肌细胞 | 第58页 |
| 1.2 NFAT参与心血管疾病的发生发展 | 第58-61页 |
| 1.2.1 NFAT与心肌肥厚 | 第59页 |
| 1.2.2 NFAT与动脉粥样硬化 | 第59-60页 |
| 1.2.3 NFAT与肺高压 | 第60-61页 |
| 2 材料 | 第61-62页 |
| 2.1 主要仪器 | 第61页 |
| 2.2 试剂及材料 | 第61-62页 |
| 3 方法 | 第62-66页 |
| 3.1 贴壁法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞及鉴定 | 第62页 |
| 3.2 肺动脉平滑肌细胞核蛋白与胞浆蛋白的提取 | 第62页 |
| 3.3 实时定量PCR | 第62-63页 |
| 3.4 Western blot | 第63页 |
| 3.5 大鼠NFATc1 siRNA的设计及干扰效率检测 | 第63-64页 |
| 3.6 大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖检测 | 第64-65页 |
| 3.6.1 CCK8测试 | 第64页 |
| 3.6.2 Brdu标记法检测细胞增殖 | 第64-65页 |
| 3.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第65页 |
| 3.8 统计分析 | 第65-66页 |
| 4 结果 | 第66-71页 |
| 4.1 DHA对肺动脉平滑肌细胞NFAT基因表达的影响 | 第66页 |
| 4.2 DHA对肺动脉平滑肌细胞NFATc1蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 4.3 NFATc1 siRNA转染肺动脉平滑肌细胞效率检测 | 第67-68页 |
| 4.4 DHA对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 | 第68-69页 |
| 4.5 DHA对肺动脉平滑肌细胞周期的影响 | 第69-70页 |
| 4.6 DHA对肺动脉平滑肌细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
| 讨论 | 第71-73页 |
| 小结 | 第73-74页 |
| 结论与展望 | 第74-75页 |
| 综述 活化T细胞核因子(NFAT)在肺动脉高压中的作用 | 第75-89页 |
| 一、NFAT的结构和调节 | 第76-81页 |
| 二、NFAT在肺血管重构中的作用 | 第81-86页 |
| 三、针对NFAT通路的PAH治疗策略 | 第86-87页 |
| 四、结论与展望 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-109页 |
| 常用缩略词对照表 | 第109-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 攻读博士学位期间的科研成果 | 第114页 |
