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宿主细胞对人类冠状病毒HCoV-229E天然免疫应答机制的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 综述第12-24页
   ·天然免疫通路第12-15页
     ·第一阶段,诱导IFN基因表达的RLR和TLR通路第12-14页
     ·第二阶段,IFN诱导的JAK-STAT信号通路第14-15页
   ·病毒应对天然免疫反应的策略第15-18页
     ·逃避策略第15-16页
     ·对抗策略第16-18页
   ·冠状病毒及研究背景第18-22页
     ·冠状病毒的分类学地位和分类第18-19页
     ·冠状病毒的基因组结构和编码的病毒蛋白第19-22页
     ·冠状病毒与天然免疫第22页
   ·本研究的方案和意义第22-24页
第二章 第1类冠状病毒与宿主天然免疫应答的研究第24-34页
   ·材料与方法第24-26页
     ·细胞和病毒第24页
     ·蛋白免疫印迹(Western blotting)第24-25页
     ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitive PCR)第25-26页
     ·酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)第26页
     ·IFN-β预处理实验第26页
     ·透射电镜实验第26页
   ·结果与分析第26-32页
     ·第Ⅰ类冠状病毒的入侵导致IRF-3的磷酸化和二聚第27-28页
     ·第Ⅰ类冠状病毒感染的细胞中检测到IFN-β基因的转录第28-29页
     ·IFN-β蛋白在第1类冠状病毒感染细胞中的表达第29-30页
     ·第Ⅰ类冠状病毒对IFN-β预处理的敏感性依赖细胞的类型第30-31页
     ·HCoV-229E和HCoV-NL63感染的细胞中均出现DMVs第31-32页
   ·讨论第32-34页
第三章 HCoV-229E编码蛋白与宿主天然免疫间的相互作用第34-43页
   ·材料与方法第34-38页
     ·细胞和病毒第34页
     ·构建HCoV-229E各基因的表达质粒第34-36页
     ·构建含IFN-β和人ISG15启动子报告基因的稳转细胞系第36-37页
     ·蛋白免疫印迹(Western blotting)第37页
     ·报告基因检测实验第37-38页
   ·结果第38-40页
     ·蛋白免疫印迹(western blotting)检测到HCoV-229E各基因的表达第38页
     ·只有nspl能抑制IFN-β和ISG15启动子的激活第38-40页
   ·讨论第40-43页
附录1 本文涉及到的专业名词简写第43-47页
附录2 本研究用到的材料、试剂和设备第47-50页
附录3 本研究所用反应体系第50-53页
附录4 硕士研究生期间参与发表的论文第53-54页
参考文献第54-64页
致谢第64页

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