摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
第一章 文献综述 | 第17-53页 |
1 灰飞虱抗药性研究概况 | 第17-27页 |
1.1 灰飞虱的分布与危害 | 第17-18页 |
1.2 灰飞虱的抗药性及交互抗性的现状 | 第18-20页 |
1.3 灰飞虱抗药性发生的生态学因素 | 第20-21页 |
1.4 灰飞虱抗性机制的研究现状 | 第21-22页 |
1.5 防治灰飞虱的杀虫剂 | 第22-26页 |
1.6 灰飞虱抗性的化学治理 | 第26-27页 |
2 昆虫的抗药性机理 | 第27-42页 |
2.1 表皮穿透速率降低 | 第28页 |
2.2 代谢抗性 | 第28-35页 |
2.3 靶标抗性 | 第35-42页 |
3 RNA干扰研究概述 | 第42-50页 |
3.1 RNA干扰的机理 | 第42-44页 |
3.2 RNA干扰的分类 | 第44-45页 |
3.3 dsRNA传导的机制 | 第45-46页 |
3.4 昆虫dsRNA传导的组成因素 | 第46-47页 |
3.5 昆虫dsRNA导入的实验方法 | 第47-49页 |
3.6 RNAi在昆虫抗药性中的研究应用 | 第49-50页 |
4 本研究的目的和意义 | 第50-53页 |
第二章 灰飞虱抗感品系的选育及抗性风险评估 | 第53-63页 |
1 材料与方法 | 第54-56页 |
1.1 供试昆虫 | 第54页 |
1.2 试虫饲养 | 第54页 |
1.3 供试药剂 | 第54-55页 |
1.4 室内毒力测定方法 | 第55页 |
1.5 抗性筛选方法 | 第55页 |
1.6 抗性现实遗传力分析 | 第55页 |
1.7 抗性风险预测 | 第55-56页 |
1.8 统计分析方法 | 第56页 |
2 结果与分析 | 第56-61页 |
2.1 抗毒死蜱品系的选育 | 第56页 |
2.2 抗溴氰菊酯品系的选育 | 第56-57页 |
2.3 灰飞虱对毒死蜱和溴氰菊酯的抗性遗传力 | 第57-58页 |
2.4 灰飞虱对毒死蜱和溴氰菊酯的抗性发展速率预测 | 第58-61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
第三章 灰飞虱抗性品系的交互抗性及抗性稳定性 | 第63-73页 |
1 材料与方法 | 第64-65页 |
1.1 供试昆虫 | 第64页 |
1.2 试虫饲养 | 第64页 |
1.3 供试药剂 | 第64页 |
1.4 交互抗性毒理测定 | 第64-65页 |
1.5 毒死蜱和溴氰菊酯的抗性稳定性 | 第65页 |
1.6 统计分析方法 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-71页 |
2.1 毒死蜱抗性品系的交互抗性 | 第65-67页 |
2.2 溴氰菊酯抗性品系的交互抗性 | 第67-71页 |
2.3 抗毒死蜱和溴氰药酯品系的抗性稳定性 | 第71页 |
3 讨论 | 第71-73页 |
第四章 灰飞虱抗毒死蜱的生化机理研究 | 第73-85页 |
1 材料与方法 | 第74-79页 |
1.1 供试昆虫 | 第74页 |
1.2 试虫饲养 | 第74页 |
1.3 供试生化试剂和仪器 | 第74-75页 |
1.4 毒理测定方法 | 第75页 |
1.5 增效剂测定方法 | 第75页 |
1.6 统计分析方法 | 第75页 |
1.7 代谢酶活力的测定 | 第75-77页 |
1.8 乙酰胆碱酯酶活力及动力学参数测定 | 第77-79页 |
2 结果与分析 | 第79-81页 |
2.1 增效剂在灰飞虱不同品系中对毒死蜱的增效作用 | 第79-80页 |
2.2 灰飞虱不同品系的解毒酶活性 | 第80-81页 |
2.3 乙酰胆碱酯酶的动力学和杀虫剂抑制效应 | 第81页 |
3 讨论 | 第81-85页 |
第五章 灰飞虱抗溴氰菊酯的生化机理及靶标机制分析 | 第85-103页 |
1 材料与方法 | 第86-93页 |
1.1 供试昆虫 | 第86页 |
1.2 试虫饲养 | 第86页 |
1.3 供试生化试剂 | 第86页 |
1.4 供试分子试剂 | 第86-87页 |
1.5 供试仪器设备 | 第87页 |
1.6 毒理测定方法 | 第87页 |
1.7 增效剂增效试验 | 第87页 |
1.8 代谢酶活力的测定 | 第87页 |
1.9 灰飞虱cDNA模板制备 | 第87-89页 |
1.10 PCR反应 | 第89-92页 |
1.11 荧光实时定量PCR | 第92-93页 |
2 结果与分析 | 第93-100页 |
2.1 增效剂试验 | 第93页 |
2.2 代谢酶活性试验 | 第93-94页 |
2.3 灰飞虱钠离子通道ⅢS3-ⅢS6区域片段的克隆 | 第94-96页 |
2.4 灰飞虱钠离子通道基因的序列相似性及进化树分析 | 第96-97页 |
2.5 灰飞虱钠离子通道基因与溴氰菊酯抗性 | 第97-100页 |
3 讨论 | 第100-103页 |
第六章 灰飞虱解毒酶基因的鉴定以及抗性相关基因的筛选 | 第103-131页 |
1 材料与方法 | 第105-114页 |
1.1 供试昆虫 | 第105页 |
1.2 试虫饲养 | 第105页 |
1.3 供试分子试剂和仪器设备 | 第105页 |
1.4 灰飞虱解毒酶基因的克隆和鉴定 | 第105-107页 |
1.5 灰飞虱抗性相关解毒酶基因半定量筛选 | 第107-108页 |
1.6 灰飞虱抗性相关解毒酶基因全长克隆 | 第108-112页 |
1.7 灰飞虱抗性相关解毒酶基因荧光定量PCR | 第112-114页 |
2 结果与分析 | 第114-127页 |
2.1 灰飞虱解毒酶基因序列的克隆鉴定 | 第114-115页 |
2.2 毒死蜱抗性相关解毒酶基因的半定量筛选 | 第115页 |
2.3 毒死蜱抗性相关解毒酶基因的定量PCR | 第115-119页 |
2.4 溴氰菊酯抗性相关解毒酶基因的半定量筛选 | 第119-121页 |
2.5 溴氰菊酯抗性相关解毒酶基因的定量PCR | 第121-125页 |
2.6 毒死蜱和溴氰菊酯品系抗性相关解毒酶基因全长克隆与分析 | 第125-127页 |
3 讨论 | 第127-131页 |
第七章 灰飞虱抗性相关解毒酶基因的RNAi分析 | 第131-151页 |
1 材料与方法 | 第132-138页 |
1.1供试昆虫 | 第132-133页 |
1.2 试虫饲养 | 第133页 |
1.3 供试分子试剂和仪器设备 | 第133页 |
1.4 dsRNA的制备 | 第133-136页 |
1.5 灰飞虱喂食dsRNA方法 | 第136-137页 |
1.6 毒死蜱和溴氰菊酯抗性相关解毒酶基因的RNAi效应检测 | 第137-138页 |
2 结果与分析 | 第138-149页 |
2.1 dsRNA的制备 | 第138-141页 |
2.2 毒死蜱和溴氰菊酯的毒理分析 | 第141-145页 |
2.3 喂食dsRNA对靶基因表达量的影响 | 第145-149页 |
3 讨论 | 第149-151页 |
全文总结 | 第151-153页 |
参考文献 | 第153-173页 |
附录 | 第173-219页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第219-221页 |
致谢 | 第221页 |