含cry1Ab和cry2Ab双基因的抗虫转基因水稻的研究
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1. 文献综述 | 第10-27页 |
| ·苏云金杆菌研究进展 | 第12-17页 |
| ·苏云金杆菌的基本特性 | 第12页 |
| ·苏云金杆菌杀虫晶体蛋白 | 第12-13页 |
| ·苏云金杆菌杀虫蛋白基因的分类 | 第13-17页 |
| ·苏云金杆菌的杀虫机理 | 第17页 |
| ·害虫对转BT作物抗性的产生及其延缓策略 | 第17-20页 |
| ·害虫对转BT作物抗性的产生 | 第17-19页 |
| ·延缓害虫对转Bt基因植物产生抗性的策略 | 第19-20页 |
| ·基因聚合策略 | 第19页 |
| ·"高剂量-庇护所"策略 | 第19-20页 |
| ·提高转基因植物Bt杀虫晶体蛋白的表达量 | 第20页 |
| ·转基因抗虫水稻的研究进展 | 第20-21页 |
| ·抗除草剂转基因水稻 | 第21-25页 |
| ·草甘膦作用机理 | 第22页 |
| ·EPSPS合成酶编码基因的研究进展 | 第22-23页 |
| ·抗除草剂转基因植物的培育策略 | 第23页 |
| ·EPSPS酶编码基因在作物遗传育种上的应用 | 第23-25页 |
| ·转基因植物的商品化 | 第25-26页 |
| ·研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 2. 材料与方法 | 第27-39页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与载体 | 第27页 |
| ·试剂与仪器 | 第27页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-39页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第28-32页 |
| ·PCR反应 | 第28页 |
| ·大肠杆菌质粒提取 | 第28-29页 |
| ·酶切反应 | 第29页 |
| ·凝胶回收 | 第29-30页 |
| ·连接反应 | 第30页 |
| ·大肠杆菌TG1感受态细胞的制备及转化 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第31-32页 |
| ·农杆菌转化克隆鉴定 | 第32页 |
| ·水稻转化表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·农杆菌介导的外源基因的水稻转化 | 第33-35页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第33页 |
| ·农杆菌与水稻愈伤的共培养 | 第33-34页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第34页 |
| ·转化植株的再生与培养 | 第34-35页 |
| ·转基因水稻的PCR鉴定 | 第35页 |
| ·植物总DNA的提取(CTAB法) | 第35页 |
| ·PCR鉴定 | 第35页 |
| ·转基因水稻的Western Blot分析 | 第35-37页 |
| ·TRIzol法提取植物组织蛋白质 | 第35-37页 |
| ·Southern blot分析 | 第37-39页 |
| ·水稻基因组DNA的提取 | 第37页 |
| ·酶切及电泳 | 第37页 |
| ·转膜(高盐转膜法) | 第37-38页 |
| ·杂交(选用DIGI-Ⅱ型试剂盒) | 第38页 |
| ·洗膜 | 第38-39页 |
| ·生物测定 | 第39页 |
| ·转基因水稻抗草甘膦检测 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·转基因水稻植株的获得 | 第39-40页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第40-45页 |
| ·转基因水稻的PCR鉴定 | 第40页 |
| ·转基因水稻Western杂交分析 | 第40-42页 |
| ·转基因水稻Southern杂交分析 | 第42-43页 |
| ·转基因水稻的生物测定 | 第43-44页 |
| ·转基因植株草甘膦抗性检测 | 第44-45页 |
| 4. 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
