摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 棉花概述 | 第10页 |
1.2 棉花耐旱、耐盐研究进展 | 第10-16页 |
1.2.1 干旱对植物的影响及胁迫响应机制 | 第10-11页 |
1.2.2 盐碱对植物的影响及胁迫响应机制 | 第11-12页 |
1.2.3 提高植物耐旱耐盐的途径 | 第12-13页 |
1.2.4 棉花耐旱、耐盐研究进展 | 第13-16页 |
1.3 抗除草剂棉花研究进展 | 第16-17页 |
1.4 植物抗逆转录因子概述 | 第17-19页 |
1.4.1 转录因子的功能 | 第17页 |
1.4.2 抗逆转录因子分类及特点 | 第17-18页 |
1.4.3 ERF/DEEB概述 | 第18-19页 |
1.5 棉花转基因育种方法 | 第19-20页 |
1.5.1 农杆菌介导法 | 第19页 |
1.5.2 花粉管通道法 | 第19页 |
1.5.3 基因枪法 | 第19-20页 |
1.6 研究目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 农杆菌介导法获得转基因棉花 | 第21-38页 |
2.1 实验材料 | 第21-26页 |
2.1.1 棉花材料 | 第21页 |
2.1.2 基因来源 | 第21页 |
2.1.3 引物序列 | 第21-22页 |
2.1.4 载体和菌种 | 第22-23页 |
2.1.5 培养基 | 第23-25页 |
2.1.6 相关试剂及缓冲液 | 第25页 |
2.1.7 仪器和设备 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-30页 |
2.2.1 携带中间载体的大肠杆菌活化及鉴定 | 第26页 |
2.2.2 农杆菌感受态制备 | 第26-27页 |
2.2.3 农杆菌转化 | 第27页 |
2.2.4 含目的基因表达载体鉴定 | 第27页 |
2.2.5 最优表达载体的筛选 | 第27-28页 |
2.2.6 遗传转化 | 第28-29页 |
2.2.7 阳性棉株鉴定 | 第29页 |
2.2.8 转化幼苗的定植 | 第29-30页 |
2.2.9 T1代转基因棉花的获得 | 第30页 |
2.3 结果及分析 | 第30-36页 |
2.3.1 农杆菌转化及鉴定 | 第30-31页 |
2.3.2 最优表达载体的筛选 | 第31-32页 |
2.3.3 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第32-34页 |
2.3.4 转基因阳性幼苗的鉴定 | 第34-35页 |
2.3.5 转化幼苗的定植 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 转基因棉花的鉴定及抗性分析 | 第38-54页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 棉花材料 | 第38页 |
3.1.2 基因来源 | 第38页 |
3.1.3 引物序列 | 第38-39页 |
3.1.4 相关试剂及缓冲液 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 T3代转基因棉花的获得 | 第39-40页 |
3.2.2 转基因棉花的抗性筛选 | 第40-43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-51页 |
3.3.1 卡那霉素筛选浓度的确定及转基因棉花大田筛选 | 第43-44页 |
3.3.2 反转录PCR检测目的基因表达情况 | 第44-45页 |
3.3.3 Southern blot结果分析 | 第45页 |
3.3.4 转基因棉花的田间农艺性状分析 | 第45-46页 |
3.3.5 大田喷施除草剂进行抗性鉴定 | 第46页 |
3.3.6 转基因棉花的耐受性分析 | 第46-51页 |
3.4 讨论 | 第51-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第63页 |