三疣梭子蟹LGBP基因的克隆与表达研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 1 绪论 | 第13-25页 |
| ·甲壳动物免疫机制概述 | 第13-17页 |
| ·细胞免疫 | 第13-14页 |
| ·体液免疫 | 第14-17页 |
| ·模式识别 | 第17-22页 |
| ·病原相关分子模式 | 第17页 |
| ·模式识别受体 | 第17-22页 |
| ·脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白研究进展 | 第22-23页 |
| ·问题与展望 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 三疣梭子蟹LGBP 基因的克隆 | 第25-43页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·细菌刺激实验 | 第27页 |
| ·总RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·SMANT cDNA 的合成 | 第28页 |
| ·保守序列的克隆 | 第28-31页 |
| ·3’RACE | 第31-32页 |
| ·5’RACE | 第32-35页 |
| ·生物信息学分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·总RNA 提取结果 | 第35页 |
| ·保守序列的克隆 | 第35页 |
| ·3’RACE | 第35-36页 |
| ·5’RACE | 第36页 |
| ·LGBP 基因的生物信息学分析 | 第36-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·SMART RACE 技术 | 第41页 |
| ·LGBP 特征分析 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 3 三疣梭子蟹LGBP 基因的表达模式分析 | 第43-51页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·总RNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-48页 |
| ·三疣梭子蟹LGBP 基因的组织分布 | 第46-47页 |
| ·三疣梭子蟹LGBP 基因的表达模式分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·RT-PCR | 第48-49页 |
| ·水产甲壳动物LGBP 基因的表达模式 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 4 三疣梭子蟹LGBP 基因的重组表达 | 第51-68页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-60页 |
| ·总RNA 的提取及SMART cDNA 的合成 | 第53页 |
| ·三疣梭子蟹LGBP 基因开放阅读框的克隆 | 第53-54页 |
| ·重组载体的构建 | 第54-55页 |
| ·重组表达 | 第55-56页 |
| ·不同诱导条件下重组蛋白的表达 | 第56-57页 |
| ·非融合蛋白的纯化 | 第57页 |
| ·抗血清的制备 | 第57-58页 |
| ·Western blot | 第58-59页 |
| ·微生物结合实验 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·LGBP 基因ORF 分析 | 第60-61页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组表达 | 第62-64页 |
| ·非融合蛋白的纯化 | 第64页 |
| ·血清效价及Western blot 结果 | 第64-65页 |
| ·微生物结合实验 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·表达载体的选择 | 第66页 |
| ·重组表达条件的优化 | 第66页 |
| ·抗血清的制备及鉴定 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 5 总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 在学研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
