| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词一览表 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| ·核酸适配子SELEX筛选研究进展 | 第9-14页 |
| ·SELEX技术简介 | 第9页 |
| ·SELEX技术的改良 | 第9-10页 |
| ·针对不同靶标的适配子的研究 | 第10-13页 |
| ·SELEX技术的优越性及其应用 | 第13-14页 |
| ·肝素的结构和功能 | 第14-16页 |
| ·结构特征 | 第14-15页 |
| ·在生物体内的分布及其生理功能 | 第15页 |
| ·肝素的药理作用 | 第15-16页 |
| ·肝素的研究现状及趋势 | 第16页 |
| ·研究目的、意义及研究内容 | 第16-18页 |
| ·研究目的 | 第16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 琼脂糖凝胶作为亲和介质SELEX筛选肝素适配子 | 第18-33页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·材料与方法 | 第18-20页 |
| ·质粒与载体 | 第18页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·初始随机文库的构建及引物的合成 | 第20页 |
| ·Epoxy-activated SepHrose固定肝素 | 第20-21页 |
| ·SELEX筛选 | 第21页 |
| ·PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·次级文库的制备 | 第22页 |
| ·DNA适配子的克隆测序及分析 | 第22-24页 |
| ·结果 | 第24-29页 |
| ·琼脂糖凝胶鉴定PCR扩增产物 | 第24页 |
| ·对称PCR扩增反应条件优化结果 | 第24-25页 |
| ·尿素浓度在PCR扩增反应的优化结果 | 第25-26页 |
| ·13轮筛选的PCR产物电泳结果 | 第26页 |
| ·克隆子序列测定结果 | 第26-27页 |
| ·适配子二级结构分析 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| ·文库的选择 | 第29-30页 |
| ·温度对SELEX筛选的影响 | 第30页 |
| ·PCR反应条件的优化对SELEX的影响 | 第30页 |
| ·ssDNA的制备方法 | 第30-31页 |
| ·适配子的克隆测序 | 第31页 |
| ·适配子的二级结构分析 | 第31页 |
| ·本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 以酶标板作为亲和介质SELEX筛选肝素适配子 | 第33-38页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料和方法 | 第33-34页 |
| ·实验样品 | 第33页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第33-34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-36页 |
| ·12 轮筛选的 PCR 产物电泳结果 | 第34-35页 |
| ·克隆子序列测定结果 | 第35页 |
| ·适配子二级结构预测 | 第35-36页 |
| ·适配子筛选固相分离介质的选择 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第四章 克隆适配子的亲和力测定 | 第38-43页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-39页 |
| ·实验样品 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·主要溶液的配制 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·对称 PCR | 第39页 |
| ·不对称PCR | 第39-40页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及切胶 | 第40页 |
| ·凝胶中回收ssDNA | 第40页 |
| ·ELISA法检测克隆子与肝素钠的亲和力 | 第40-41页 |
| ·结果和讨论 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第五章 总结与展望 | 第43-44页 |
| ·总结 | 第43页 |
| ·展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
