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拟南芥AtMAP4Kα2与AtMO25的克隆、表达、纯化及初步晶体学研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
第1章 文献综述第8-18页
   ·植物蛋白激酶第8-10页
     ·概论第8-9页
     ·拟南芥MAP激酶第9页
     ·MAPK在植物细胞周期中的作用第9-10页
   ·哺乳动物GCKs第10-14页
     ·概述第10-11页
     ·GCK Ⅲ激酶第11-12页
     ·MST4-MO25晶体结构第12-14页
   ·蛋白质结晶学第14-18页
     ·结晶方法第14-16页
     ·晶体的优化第16-18页
第2章 引言第18-20页
   ·研究目的和意义第18页
   ·技术路线第18-20页
第3章 实验材料与方法第20-30页
   ·实验材料、仪器和试剂第20-23页
     ·实验材料第20页
     ·实验仪器第20-21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验试剂的配制第21-23页
   ·实验方法第23-30页
     ·目的基因的克隆第23-24页
     ·目的蛋白的表达第24-25页
     ·目的蛋白的纯化第25-27页
     ·蛋白质晶体培养第27页
     ·蛋白质晶体优化第27-29页
     ·X-射线晶体衍射和数据处理第29-30页
第4章 结果与分析第30-40页
   ·AtMAP4Kα2的克隆第30页
   ·AtMAP4Kα2的纯化第30-31页
     ·中量表达测试第30页
     ·亲和纯化第30-31页
     ·分子筛层析第31页
   ·AtMAP4Kα2结晶及优化第31-35页
     ·PCT测试第31-32页
     ·晶体培养第32页
     ·晶体优化第32-35页
   ·AtMAP4Kα2晶体衍射第35页
   ·AtMAP4Kα2晶体衍射数据处理第35-36页
   ·AtMO25的克隆第36页
   ·AtMO25的纯化第36-38页
     ·中量表达测试第36页
     ·纯化AtMO25第36-37页
     ·AtMO25标签去除第37页
     ·AtMO25分子筛层析第37-38页
   ·AtMO25的结晶第38页
   ·TEV酶纯化第38-40页
第5章 讨论第40-42页
   ·TEV酶活性第40页
   ·拟南芥AtMAP4Kα2与人源MST4的序列比较第40页
   ·拟南芥AtMAP4Kα2的晶体优化第40页
   ·拟南芥AtMAP4Kα2激酶结构域及WSF基序的纯化第40-41页
   ·拟南芥AtMO25与人源MO25的序列比较第41页
   ·拟南芥AtMO25的纯化第41-42页
第6章 结论第42-44页
参考文献第44-48页
附录第48-50页
致谢第50-52页
研究生期间发表文章第52页

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