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基于Tale的人工启动子的开发和应用研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
1. 前言第10-20页
   ·水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的概况第10-11页
     ·水稻白叶枯病菌第10页
     ·水稻细菌性条斑病病菌第10-11页
   ·TAL effectors的结构特点及研究进展第11-13页
   ·国内外TALE技术发展概况及发展趋势第13-15页
   ·启动子的分类第15-16页
     ·启动子的概念第15页
     ·启动子的分类第15-16页
   ·白叶枯病菌与水稻的抗病基因Xa21识别的分子机理第16-18页
   ·技术路线第18-19页
   ·本研究目的和意义第19-20页
2. 实验材料与方法第20-43页
   ·实验材料与试剂第20-21页
     ·植物材料第20页
     ·菌株与载体质粒第20页
     ·主要的工具酶和实验试剂第20页
     ·实验仪器第20页
     ·引物第20-21页
   ·实验方法第21-43页
     ·人工设计Tale启动子的方法第21-23页
     ·目的基因XooTaleP、Xa2Ipk的克隆第23-25页
     ·克隆载体PMD20T-XooTaleP的构建及鉴定第25-27页
     ·克隆载体PMD20T-Xa21pk的构建及鉴定第27页
     ·植物表达载体的构建及鉴定第27-34页
     ·农杆菌的转化及鉴定第34-35页
     ·转基因试管苗水稻的获得第35-36页
     ·转基因试管苗水稻的DNA分子检测第36-38页
     ·转基因水稻XooXocTaleP-1301的GUS染色的定性、定量分析第38-39页
     ·XooXocTaleP-Xa21、XooXocTaleP-Xa21pk和pCAMBIA1301转基因水稻的半定量RT-PCR检测第39-42页
     ·转基因试管苗To代水稻植株的抗病性分析第42-43页
3. 结果与分析第43-61页
   ·XooTaleP-1301,XooTaleP-Xa21,XooTaleP-Xa21pk,XooXocTaleP-1301,XooXocTaleP-Xa21和XooXocTaleP-Xa21pk表达载体质粒的构建及鉴定第43-50页
     ·目的基因XooTaleP的克隆第43页
     ·目的基因Xa2Ipk的克隆第43-44页
     ·XooTaleP-1301重组质粒的构建和检测第44-45页
     ·XooTaleP-Xa21重组质粒的构建和检测第45-46页
     ·XooTaleP-Xa21pk重组质粒的构建和检测第46-47页
     ·XooXocTaleP-pCAMBIA1301重组质粒的构建及鉴定第47-48页
     ·XooXocTaleP-Xa21重组质粒的构建及鉴定第48-49页
     ·XooXocTaleP-Xa21pk重组质粒的构建及鉴定第49-50页
   ·XooTaleP-1301,XooTaleP-Xa21,XooTaleP-Xa21pk,XooXocTaleP-1301,XooXocTaleP-Xa21,XooXocTaleP-Xa21pk和pCAMBIA1301七个重组质粒转化农杆菌的检测第50-52页
   ·T_0代转基因试管水稻的获得第52-53页
   ·T_0代转基因试管苗水稻DNA的PCR鉴定第53-56页
   ·XooXocTaleP-1301、XooTaleP-1301转基因水稻的GUS定性、定量分析第56-58页
     ·XooXocTaleP-1301、XooTaleP-1301转基因水稻的GUS定性分析第56-57页
     ·XooXocTaleP-1301的GUS定量分析第57-58页
   ·XooXocTaleP-Xa21,XooXocTaleP-Xa21pk,pCAMBIA1301转基因水稻的半定量RT-PCR鉴定第58-59页
     ·XooXocTaleP-Xa21,XooXocTaleP-Xa21pk,pCAMBIA1301转基因水稻RNA提取第58页
     ·XooXocTaleP-Xa21,XooXocTaleP-Xa21pk,pCAMBIA1301转基因水稻的半定量RT-PCR鉴定第58-59页
   ·T_0代转基因水稻植株的抗病性分析第59-61页
4. 讨论第61-63页
   ·Xa21的抗病机制第61页
   ·基于TALE的诱导启动子的优化设计第61页
   ·诱导表达启动子的应用前景第61-63页
5. 结论第63-64页
参考文献第64-69页
附录第69-73页
 附录一:实验相关试剂的配制方法第69-72页
 附录二:缩写对照表(Abbreviations)第72-73页
作者简介第73页
致谢第73页

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