摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
前言 | 第8-23页 |
1 卵菌效应分子 | 第8-17页 |
·RXLR效应分子 | 第9-15页 |
·RXLR效应分子与植物之间的互作 | 第15-17页 |
2 蛋白磷酸酶2A | 第17-23页 |
·结构 | 第17-19页 |
·功能 | 第19-23页 |
材料与方法 | 第23-40页 |
1 供试菌株与植物材料 | 第23-24页 |
2 主要质粒载体 | 第24页 |
3 核酸的提取、合成与纯化 | 第24-29页 |
·基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
·总RNA的提取和cDNA合成 | 第25-27页 |
·质粒DNA的提取 | 第27-29页 |
·DNA片段的回收纯化 | 第29页 |
4 载体的构建 | 第29-31页 |
5 感受态的制备与转化 | 第31-34页 |
·大肠杆菌DH5α | 第31-32页 |
·农杆菌GV3101 | 第32-33页 |
·酵母AH109和Y187 | 第33-34页 |
6 农杆菌介导的瞬时表达分析 | 第34页 |
7 酵母双杂交 | 第34-38页 |
·诱饵蛋白自激活与毒性分析 | 第34-35页 |
·文库筛选 | 第35-36页 |
·互作克隆的分析 | 第36-38页 |
8 qPCR | 第38-39页 |
9 病毒诱导的基因沉默 | 第39页 |
10 数据统计分析 | 第39-40页 |
结果与分析 | 第40-57页 |
1 辣椒疫霉RXLR效应分子PcAvh1引起PCD反应 | 第40-41页 |
2 PcAvh1在本氏烟中的互作因子 | 第41-48页 |
·酵母菌株 | 第41页 |
·诱饵蛋白不自激活且不影响酵母生长 | 第41-42页 |
·辣椒疫霉侵染本氏烟文库 | 第42-44页 |
·酵母文库中的阳性克隆 | 第44-45页 |
·本氏烟PP2A与PcAvh1发生互作 | 第45-48页 |
3 本氏烟PP2A基因的表达特征 | 第48-52页 |
·PP2A在辣椒疫霉侵染本氏烟的阶段下调表达 | 第48-51页 |
·PP2A在本氏烟的花中高量表达 | 第51-52页 |
4 本氏烟PP2A的功能 | 第52-57页 |
·PP2A基因的沉默影响植株的生长发育 | 第52-55页 |
·PP2A基因的沉默削弱植物对辣椒疫霉侵染的抗性 | 第55-57页 |
讨论 | 第57-61页 |
1 辣椒疫霉效应分子PcAvh1激发PCD反应 | 第57页 |
2 辣椒疫霉效应分子PcAvh1与本氏烟PP2A发生互作 | 第57-59页 |
3 PP2A的沉默不影响PcAvh1触发本氏烟的PCD反应 | 第59-61页 |
展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-76页 |
附录一 本论文所使用的试剂及培养基 | 第76-81页 |
附录二 本论文所使用的仪器 | 第81-82页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |