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辣椒疫霉效应蛋白PcAvh1与植物互作因子的鉴定和功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
前言第8-23页
 1 卵菌效应分子第8-17页
   ·RXLR效应分子第9-15页
   ·RXLR效应分子与植物之间的互作第15-17页
 2 蛋白磷酸酶2A第17-23页
   ·结构第17-19页
   ·功能第19-23页
材料与方法第23-40页
 1 供试菌株与植物材料第23-24页
 2 主要质粒载体第24页
 3 核酸的提取、合成与纯化第24-29页
   ·基因组DNA的提取第24-25页
   ·总RNA的提取和cDNA合成第25-27页
   ·质粒DNA的提取第27-29页
   ·DNA片段的回收纯化第29页
 4 载体的构建第29-31页
 5 感受态的制备与转化第31-34页
   ·大肠杆菌DH5α第31-32页
   ·农杆菌GV3101第32-33页
   ·酵母AH109和Y187第33-34页
 6 农杆菌介导的瞬时表达分析第34页
 7 酵母双杂交第34-38页
   ·诱饵蛋白自激活与毒性分析第34-35页
   ·文库筛选第35-36页
   ·互作克隆的分析第36-38页
 8 qPCR第38-39页
 9 病毒诱导的基因沉默第39页
 10 数据统计分析第39-40页
结果与分析第40-57页
 1 辣椒疫霉RXLR效应分子PcAvh1引起PCD反应第40-41页
 2 PcAvh1在本氏烟中的互作因子第41-48页
   ·酵母菌株第41页
   ·诱饵蛋白不自激活且不影响酵母生长第41-42页
   ·辣椒疫霉侵染本氏烟文库第42-44页
   ·酵母文库中的阳性克隆第44-45页
   ·本氏烟PP2A与PcAvh1发生互作第45-48页
 3 本氏烟PP2A基因的表达特征第48-52页
   ·PP2A在辣椒疫霉侵染本氏烟的阶段下调表达第48-51页
   ·PP2A在本氏烟的花中高量表达第51-52页
 4 本氏烟PP2A的功能第52-57页
   ·PP2A基因的沉默影响植株的生长发育第52-55页
   ·PP2A基因的沉默削弱植物对辣椒疫霉侵染的抗性第55-57页
讨论第57-61页
 1 辣椒疫霉效应分子PcAvh1激发PCD反应第57页
 2 辣椒疫霉效应分子PcAvh1与本氏烟PP2A发生互作第57-59页
 3 PP2A的沉默不影响PcAvh1触发本氏烟的PCD反应第59-61页
展望第61-62页
参考文献第62-76页
附录一 本论文所使用的试剂及培养基第76-81页
附录二 本论文所使用的仪器第81-82页
攻读学位期间发表的论文第82-83页
致谢第83-84页

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