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猪瘟病毒蛋白对其3UTR的调节作用

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一部分 背景介绍第10-16页
 1 猪瘟(Classical swine fever)第10页
 2 猪瘟病毒第10-13页
 3 猪瘟病毒C蛋白的主要功能第13-15页
 4 研究目的和意义第15-16页
第二部分 猪瘟病毒蛋白真核表达载体的构建及其表达检测第16-48页
 1 材料第16-23页
   ·载体、菌株和细胞系第16页
   ·主要试剂第16-17页
   ·溶液配制第17-22页
   ·主要仪器设备第22-23页
 2 方法第23-41页
   ·引物的设计与合成第23-24页
   ·重组质粒的构建与提取第24-37页
   ·细胞的复苏与培养第37-38页
   ·细胞的转染第38-39页
   ·Western Blot第39-41页
 3 结果第41-47页
   ·猪瘟病毒蛋白真核表达载体的构建与鉴定第41-46页
   ·猪瘟病毒蛋白的真核表达与检测第46-47页
 4 结论第47-48页
第三部分 猪瘟病毒蛋白对其 3’UTR功能发挥的影响第48-53页
 1 材料第48页
   ·载体、质粒和细胞系第48页
   ·主要试剂第48页
   ·主要仪器设备第48页
 2 方法第48-49页
   ·细胞的复苏与培养第48页
   ·细胞转染第48-49页
   ·双荧光素酶相对活性的检测第49页
 3 结果第49-51页
   ·猪瘟病毒结构蛋白对其 3’UTR功能发挥的影响第49-50页
   ·猪瘟病毒非结构蛋白对其 3’UTR功能发挥的影响第50-51页
 4 讨论第51-53页
第四部分 猪瘟病毒C蛋白对其 3’UTR功能发挥的影响第53-64页
 1 材料第53页
 2 方法第53-56页
   ·猪瘟病毒 3’UTR及C蛋白的结构及功能分析第53-54页
   ·引物的设计与合成第54页
   ·pCMV-C- deletion和pMIR105157重组质粒的构建与提取第54-55页
   ·细胞的复苏与培养第55-56页
   ·细胞转染第56页
   ·western blot第56页
   ·双荧光素酶活性检测第56页
 3 结果第56-62页
   ·猪瘟病毒 3’UTR SL-3 区域荧光素酶表达载体的构建与鉴定第56-57页
   ·猪瘟病毒C蛋白突变载体的构建、表达与检测第57页
   ·猪瘟病毒C蛋白对其 3’UTR功能的影响第57-62页
 4 讨论第62-64页
参考文献第64-68页
附录第68-75页
致谢第75页

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