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2型猪链球菌SSU05-0474蛋白的单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

中文摘要第1-14页
Abstract第14-16页
第一章 文献综述第16-23页
   ·猪链球菌的概述第16-17页
   ·2型猪链球菌的概述第17-22页
     ·病原学第17页
     ·毒力因子第17-18页
     ·流行病学第18-19页
     ·致病机制第19-20页
     ·临床症状第20-21页
     ·诊断和防治第21-22页
   ·研究的目的与意义第22-23页
第二章 2型猪链球菌SSU05-0474基因的原核表达及蛋白的纯化第23-35页
   ·材料第23-26页
     ·菌种,质粒第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·主要试剂的配制第24-26页
   ·方法第26-32页
     ·载体的构建第26-30页
     ·SsMps蛋白的小量表达第30页
     ·pET22b空载体的小量表达第30页
     ·SsMps蛋白的大量表达及纯化第30-31页
     ·SsMps蛋白的浓缩第31页
     ·SsMps蛋白的除盐第31页
     ·SsMps蛋白的Western-Blot分析第31-32页
   ·结果第32-33页
     ·SsMps基因的PCR扩增及重组质粒的双酶切鉴定结果第32页
     ·SsMps蛋白的表达与纯化结果第32-33页
   ·讨论第33-34页
   ·小结第34-35页
第三章 2型猪链球菌SSU05-0474单克隆抗体制备和特性的研究第35-47页
   ·材料第35-36页
     ·细胞和实验动物第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要仪器第35-36页
   ·方法第36-42页
     ·动物免疫第36页
     ·ELISA检测抗体效价第36-37页
     ·细胞融合第37-39页
     ·杂交瘤细胞的筛选与克隆化第39-40页
     ·单克隆抗体腹水的制备第40-41页
     ·单克隆抗体的纯化第41页
     ·单克隆抗体效价的检测第41页
     ·单克隆抗体亚型的鉴定第41-42页
     ·单克隆抗体特异性的检测第42页
   ·结果第42-45页
     ·小鼠三次免疫后抗体效价的检测结果第42-43页
     ·融合11天后杂交瘤细胞培养上清效价的检测结果第43页
     ·单克隆抗体效价的检测结果第43-44页
     ·单克隆抗体亚类的鉴定结果第44页
     ·单克隆抗体特异性的检测结果第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第四章 2型猪链球菌SSU05-0474蛋白抗原表位的鉴定第47-57页
   ·材料第47-49页
     ·主要试剂第47页
     ·主要仪器第47页
     ·溶液的配制第47-49页
   ·方法第49-53页
     ·噬菌体筛选步骤第49-50页
     ·噬菌体滴度的测定第50-51页
     ·噬菌斑的扩增第51页
     ·噬菌体DNA对靶分子结合的ELISA检测第51页
     ·噬菌体DNA的纯化及测序第51-52页
     ·表位多肽的推导与表位分析第52页
     ·合成多肽与SSU05-0474单抗结合的特异性检测第52页
     ·合成多肽对SSU05-0474蛋白与单抗的竞争性抑制第52-53页
   ·结果第53-56页
     ·扩增的噬菌体贮液对单抗1D9结合的ELISA结果第53页
     ·阳性噬菌体DNA测序及同源性比对结果第53-54页
     ·SsMps蛋白的表位多肽与SsMps蛋白单克隆抗体1D9的反应结果第54-55页
     ·SsMps蛋白的表位多肽与SsMps蛋白的竞争性抑制结果第55-56页
   ·讨论第56页
   ·小结第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间文章发表情况第67页

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