| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 (文献综述)RNA解旋酶结构与功能 | 第11-29页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·RNaseH结构与功能 | 第11-20页 |
| ·RNase H的发现 | 第11-12页 |
| ·RNase H结构 | 第12-16页 |
| ·结构域 | 第12-15页 |
| ·结晶结构 | 第15-16页 |
| ·RNase H功能 | 第16-20页 |
| ·RNase H在复制中作用 | 第16-17页 |
| ·DNA修复 | 第17-19页 |
| ·RNase H在转录中的功能 | 第19页 |
| ·RNase H在逆转录中的功能 | 第19-20页 |
| ·RNase R结构和功能 | 第20-26页 |
| ·RNase R的发现 | 第20-21页 |
| ·RNase R结构 | 第21-22页 |
| ·RNase R功能 | 第22-26页 |
| ·RNase R与核糖体的质量控制 | 第22页 |
| ·RNase R与反式翻译 | 第22-25页 |
| ·RNase R解旋酶功能 | 第25-26页 |
| ·DeaD解旋酶 | 第26-28页 |
| ·结构域 | 第27页 |
| ·DeaD功能 | 第27-28页 |
| ·DeaD与核糖体合成 | 第27-28页 |
| ·DeaD与翻译起始 | 第28页 |
| ·DeaD与mRNA降解和稳定 | 第28页 |
| ·结语 | 第28-29页 |
| 第二章 大肠杆菌DeaD蛋白与DNA复制起始 | 第29-61页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第30-37页 |
| ·菌种与质粒 | 第30-31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·实验试剂药品来源 | 第31页 |
| ·主要仪器与设备 | 第31-32页 |
| ·主要培养基及试剂的配制 | 第32-37页 |
| ·实验方法 | 第37-46页 |
| ·质粒构建 | 第37页 |
| ·感受态细胞制备 | 第37-38页 |
| ·转化 | 第38-39页 |
| ·P1转导 | 第39-40页 |
| ·细胞倍增时间(doubling time)的测定 | 第40-41页 |
| ·流式细胞仪分析样品制备 | 第41-42页 |
| ·显微镜样品的制备 | 第42页 |
| ·纯化蛋白 | 第42-44页 |
| ·Western blot分析 | 第44页 |
| ·细菌总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·蛋白与RNA相互作用 | 第45页 |
| ·定点突变 | 第45页 |
| ·一步失活法构建△deaD突变体 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-59页 |
| ·DeaD对染色体复制起始的影响 | 第46-51页 |
| ·△deaD突变菌株的鉴定 | 第46-47页 |
| ·DeaD蛋白影响染色体复制起始 | 第47-49页 |
| ·△deaD突变体生长缓慢 | 第49-50页 |
| ·deaD基因的缺失致使细胞变长 | 第50-51页 |
| ·DeaD与RNase R互补 | 第51-55页 |
| ·ArcA不能替换DeaD功能 | 第51-53页 |
| ·DeaD与RNase R功能互补 | 第53-55页 |
| ·DeaD降解RNA | 第55-59页 |
| ·DeaD蛋白能降解RNA | 第55-56页 |
| ·DeaD酶活性中心在C端 | 第56-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·DeaD蛋白对DNA复制起始有影响 | 第59页 |
| ·DeaD与RNase R互补 | 第59-60页 |
| ·D156A和E157A突变使DeaD丧失功能 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |