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幽门螺杆菌cagA基因可变区多态性对其功能的影响

缩略词表第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
前言第12-19页
 1. CAGA及分型第12-13页
   ·CagA蛋白第12页
   ·CagA蛋白分型第12-13页
 2. CAGA进入宿主细胞后的生物学活动第13-16页
   ·膜相关的生物学活动第13-14页
   ·磷酸化依赖的生物学活动第14-15页
   ·不依赖磷酸化的生物学活动第15-16页
 3. CAGA对宿主细胞的影响及与胃癌的关系第16-18页
   ·CagA与宿主细胞“蜂鸟状”改变第16-17页
   ·CagA与宿主细胞IL-8 表达第17页
   ·CagA及其亚型与胃癌第17-18页
 4. 小结第18-19页
第一章 cagA基因的优化与人工合成及其真核表达载体的构建第19-36页
 第一部分 优化菌源CAGA基因第19-28页
  1. 材料第19-20页
   ·选取cagA基因序列第19页
   ·软件及网址第19-20页
  2. 方法第20页
   ·基因优化流程第20页
   ·分析cagA GC含量第20页
   ·分析cagA密码子偏性第20页
   ·分析cagA隐蔽剪接位点第20页
   ·分析cagA二核苷酸频率第20页
  3. 结果第20-26页
   ·cagA基因序列的选择第20-21页
   ·cagA NCTC11637 基因分析及优化第21-25页
   ·cagA F75、cagA PNGhigh85 和cagA Shi470 基因分析及优化第25-26页
  4. 讨论第26-27页
  5. 小结第27-28页
 第二部分CAGA基因的合成与真核表达载体的构建第28-36页
  1. 材料第28页
   ·菌种与质粒第28页
   ·酶及生化试剂第28页
   ·cagA基因片段及引物第28页
  2. 方法第28-31页
   ·基因片段的扩增第28-29页
   ·酶切、回收及纯化载体质粒第29页
   ·各型cagAHS真核表达载体的构建及PCR验证第29-30页
   ·各型pcDNA3.1-cagAHS转化E.coli DH-5α第30页
   ·挑选及鉴定目的重组菌第30-31页
   ·各型pcDNA3.1-cagAHS质粒提取及浓度测定第31页
  3. 结果第31-34页
   ·各型cagAHS基因真核表达载体的构建、PCR鉴定及基因测序第31-34页
   ·各型pcDNA3.1-cagAHS质粒提取及浓度测定第34页
  4. 讨论第34-35页
  5. 小结第35-36页
第二章 不同亚型CagA对AGS细胞形态及IL-8 表达的影响第36-47页
 1. 材料第36页
   ·质粒第36页
   ·试剂第36页
 2. 方法第36-39页
   ·AGS细胞的复苏、培养及传代第36-37页
   ·AGS细胞的瞬时转染第37-38页
   ·各型cagA HS瞬时转染AGS后CagA表达水平的WB鉴定第38页
   ·各型cagA HS瞬时转染AGS对细胞形态的影响第38-39页
   ·各型cagA HS瞬时转染AGS对IL-8 表达量的影响第39页
   ·相关数据统计学分析说明第39页
 3. 结果第39-44页
   ·各型cagA HS重组质粒瞬时转染AGS的WB鉴定第39-40页
   ·各型cagA HS瞬时转染AGS对细胞形态的影响第40-43页
   ·各型cagA HS瞬时转染AGS对IL-8 表达量的影响第43-44页
 4. 讨论第44-45页
 5. 小结第45-47页
第三章 CagA EPIYA多态性与胃病的关系研究第47-58页
 1. 材料第47页
   ·胃镜标本第47页
   ·试剂第47页
 2. 方法第47-50页
   ·人胃镜活检标本的选取、保存及信息收集第47-48页
   ·人胃镜活检标本组织DNA提取第48页
   ·人胃镜活检标本组织DNA PCR扩增cagA C端可变区序列第48-50页
   ·相关数据统计学分析说明第50页
 3. 结果第50-55页
   ·人胃镜活检标本的选取、保存及信息收集第50-51页
   ·人胃镜活检标本组织DNA PCR扩增cagA C端可变区序列第51-53页
   ·cagA C端可变区序列特征与胃病第53-55页
 4. 讨论第55-56页
 5. 小结第56-58页
总结第58-60页
参考文献第60-67页
附录第67-72页
个人论著第72-84页
 参考文献第81-84页
个人简历第84-85页
致谢第85页

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