中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
引言 | 第12-17页 |
参考文献 | 第14-17页 |
第一部分:食管鳞癌组织中转录因子PAX2 的表达及其临床意义 | 第17-26页 |
材料 | 第17-18页 |
1. 组织样本 | 第17页 |
2. 试剂 | 第17-18页 |
3. 仪器 | 第18页 |
方法 | 第18-19页 |
1. 免疫组织化学染色 | 第18-19页 |
2. 统计学分析 | 第19页 |
结果 | 第19-23页 |
1. 患者组织病理学特征统计情况 | 第19-20页 |
2. 食管鳞癌组织中PAX2 表达水平显著升高 | 第20-21页 |
3. PAX2 表达水平与食管鳞状细胞癌(ESCC)临床病理学相关性分析 | 第21-23页 |
讨论 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-26页 |
第二部分PAX2 在食管癌中的生物学功能研究 | 第26-49页 |
前言 | 第26页 |
材料 | 第26-31页 |
1. 细胞株 | 第26页 |
2. 试剂 | 第26-29页 |
3. RT-PCR引物 | 第29-30页 |
4. 仪器 | 第30-31页 |
方法 | 第31-37页 |
1. PAX2 过表达载体与靶向PAX2 的siRNA | 第31页 |
2. 质粒载体的抽取 | 第31-32页 |
3. PBS配制与胎牛血清的灭活处理 | 第32页 |
4. 细胞培养 | 第32-33页 |
5. 细胞转染 | 第33页 |
6. 细胞活性实验 | 第33页 |
7. 克隆形成实验 | 第33-34页 |
8. 体外迁移实验 | 第34-35页 |
9. Western Blot | 第35-36页 |
10. 克隆形成实验检测PAX2 对细胞放射敏感的影响 | 第36页 |
11. 数据分析 | 第36-37页 |
结果 | 第37-44页 |
1. 验证过表达和下调PAX2 后PAX2 蛋白质的表达 | 第37-38页 |
2. PAX2 对食管癌生长的影响 | 第38-39页 |
3. PAX2 对食管癌细胞克隆形成的影响 | 第39-41页 |
4. PAX2 对食管癌细胞侵袭能力的影响 | 第41-43页 |
5. PAX2 对食管癌细胞放射敏感性的影响 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
第三部分PAX2 在食管癌细胞中转录调控机制研究 | 第49-71页 |
前言 | 第49-50页 |
材料 | 第50页 |
1. 试剂 | 第50页 |
2. 仪器 | 第50页 |
方法 | 第50-56页 |
1. 表达谱芯片检测PAX2 调控的基因表达谱 | 第50-51页 |
2. TRIzol法提取细胞总RNA | 第51-52页 |
3. cDNA的制备 | 第52-53页 |
4. 荧光实时定量PCR检测目的基因的表达 | 第53-54页 |
5. 荧光素酶报告基因检测 | 第54-55页 |
6. 染色质免疫共沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation, ChIP) | 第55页 |
7. 统计学分析 | 第55-56页 |
结果 | 第56-67页 |
1. RNA提取 | 第56页 |
2. RT-PCR验证PAX2 的表达 | 第56-57页 |
3. 表达谱芯片筛选差异表达的mRNA | 第57页 |
4. PAX2 过表达基因表达谱变化 | 第57-63页 |
5. RT-PCR验证芯片结果 | 第63页 |
6. PAX2 对IL-5 调控机制的研究 | 第63-65页 |
7. RT-PCR检测PAX2 对IL-5 的转录调控 | 第65-66页 |
8. 染色质免疫共沉淀(Ch IP)检测PAX2 与IL-5 启动子的结合 | 第66页 |
9. IL-5 可促进食管癌的侵袭 | 第66-67页 |
10. 食管癌组织中PAX2 中IL-5 的表达显著相关 | 第67页 |
讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
综述 | 第72-93页 |
参考文献 | 第83-93页 |
博士期间发表的论文 | 第93页 |
博士期间参与的课题 | 第93-94页 |
英文缩略词表 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |