刺五加胚性细胞团形成差异表达基因的筛选及克隆
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| ·植物体细胞胚发生 | 第8-9页 |
| ·刺五加体细胞胚发生研究 | 第9-10页 |
| ·刺五加体细胞胚的发生方式的研究进展 | 第9-10页 |
| ·刺五加体细胞胚相关生理生化研究 | 第10页 |
| ·植物体细胞胚发生的相关基因研究进展 | 第10-12页 |
| ·晚期胚胎丰富蛋白基因 | 第10-11页 |
| ·AP2/EREBP基因 | 第11页 |
| ·Leafy Cotyledon(LEC)基因 | 第11页 |
| ·体细胞胚发生应答激酶 | 第11-12页 |
| ·RACE克隆技术概述 | 第12-14页 |
| ·RACE简述及其应用 | 第12-13页 |
| ·SMART-RACE技术 | 第13-14页 |
| ·研究目的与意义 | 第14-15页 |
| ·研究技术路线 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·实验材料与试剂 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·培养基的配制 | 第16页 |
| ·RNA提取试剂 | 第16-17页 |
| ·其他常用试剂 | 第17页 |
| ·抗生素 | 第17页 |
| ·菌种和克隆载体 | 第17页 |
| ·实验用具及仪器 | 第17页 |
| ·引物及测序 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-24页 |
| ·基因芯片数据分析 | 第17-18页 |
| ·RNA提取 | 第18页 |
| ·RNA反转录 | 第18-19页 |
| ·目的基因的PCR检测 | 第19页 |
| ·目的基因的实时荧光定量PCR | 第19页 |
| ·目的基因的全长获得 | 第19-23页 |
| ·超薄切片 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-63页 |
| ·基因芯片分析 | 第24-27页 |
| ·目的基因的实时荧光定量PCR检测 | 第27-33页 |
| ·挑选基因 | 第27页 |
| ·总RNA提取 | 第27-28页 |
| ·cDNA质量检测 | 第28页 |
| ·RT-PCR检测引物 | 第28-29页 |
| ·目的基因的定量PCR检测 | 第29-33页 |
| ·目的基因全长克隆 | 第33-40页 |
| ·cDNA片段比对 | 第33-35页 |
| ·总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第35页 |
| ·EsAP21基因的克隆 | 第35-38页 |
| ·EsXET1基因的克隆 | 第38-40页 |
| ·EsPT1基因的RACE克隆及全长cDNA验证 | 第40页 |
| ·生物信息学分析 | 第40-60页 |
| ·EsAP21基因全长基因序列的生物信息学分析 | 第40-48页 |
| ·EsXET1基因全长基因序列的生物信息学分析 | 第48-53页 |
| ·EsPT1基因全长基因序列的生物信息学分析 | 第53-60页 |
| ·透射电子显微镜细胞形态观察 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| ·刺五加RNA的提取条件优化 | 第63页 |
| ·胚性细胞团相关基因的差异表达 | 第63-65页 |
| ·透射电镜下的体胚细胞比较 | 第65-66页 |
| ·需继续开展的研究 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
