| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶的研究概况 | 第14-17页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶的功能分析 | 第14页 |
| ·细菌甜菜碱醛脱氢酶研究 | 第14-16页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶的转基因研究 | 第16页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶的常用纯化方法 | 第16-17页 |
| ·细菌分类鉴定方法 | 第17-23页 |
| ·细菌常规鉴定法 | 第18页 |
| ·数值鉴定法 | 第18页 |
| ·化学分类鉴定法 | 第18-22页 |
| ·分子遗传学鉴定法 | 第22-23页 |
| ·Halomonadaceae科的研究概况 | 第23-27页 |
| ·Halomonadaceae科一般生理生化特性 | 第23-24页 |
| ·Halomonadaceae科新种描述的最小标准 | 第24-26页 |
| ·gyrB与rpoD基因序列分析 | 第26-27页 |
| ·Chromohalobacter属的研究概况 | 第27-28页 |
| ·Chromohalobacter属一般生理生化特性 | 第27-28页 |
| ·本研究的立题依据、研究内容及技术路线 | 第28-30页 |
| ·立题依据 | 第28页 |
| ·研究内容 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-30页 |
| 第二章 甜菜碱醛脱氢酶异源表达及其功能分析 | 第30-45页 |
| ·实验材料与方法 | 第30-37页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·色盐杆菌DSM 22428~T基因组的提取 | 第31-32页 |
| ·betB基因的引物设计 | 第32页 |
| ·betB基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第33页 |
| ·betB基因与表达质粒的酶切 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33-34页 |
| ·受体感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34-35页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第35页 |
| ·双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·测序鉴定 | 第35-36页 |
| ·蛋白表达检测 | 第36页 |
| ·野生菌株甜菜碱醛脱氢酶功能分析 | 第36页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶异源表达功能分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·betB基因的PCR扩增 | 第37页 |
| ·双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·测序鉴定 | 第38-39页 |
| ·蛋白表达检测 | 第39-40页 |
| ·野生菌株甜菜碱醛脱氢酶功能分析 | 第40-41页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶异源表达功能分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 重组甜菜碱醛脱氢酶的提取与纯化 | 第45-54页 |
| ·实验材料与方法 | 第45-49页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·蛋白的过量表达 | 第46-47页 |
| ·蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白含量 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·镍柱亲和层析 | 第49-50页 |
| ·离子交换层析 | 第50-51页 |
| ·凝胶过滤层析(Superdex-200) | 第51-52页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白含量 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 甜菜碱醛脱氢酶的性质研究 | 第54-63页 |
| ·实验材料与方法 | 第54-58页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·溶液的配制 | 第54-55页 |
| ·不同盐浓度下酶活力的测定 | 第55-56页 |
| ·不同pH值下酶活力的测定 | 第56-57页 |
| ·酶比活力的计算 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-62页 |
| ·不同盐浓度下的酶活力测定 | 第58-60页 |
| ·不同pH值下酶活力的测定 | 第60-61页 |
| ·酶比活力的计算 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第五章 菌株DSM 22428~T新种鉴定 | 第63-92页 |
| ·实验材料与方法 | 第63-75页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·主要试剂 | 第64-65页 |
| ·培养基 | 第65-66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·菌株的活化 | 第66页 |
| ·生理生化鉴定 | 第66-70页 |
| ·16S rRNA、gyrB和rpoD基因序列的系统发育分析 | 第70-72页 |
| ·菌株DSM 22428~T与六株参考菌株的DNA-DNA杂交 | 第72-74页 |
| ·菌株DSM 22428~T与C.israelensis DSM6768~T脂肪酸的测定 | 第74页 |
| ·菌株DSM 22428~T极性脂与呼吸醌的测定 | 第74-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-89页 |
| ·生理生化鉴定 | 第75-78页 |
| ·16S rRNA、gyrB和rpoD基因序列的系统发育分析 | 第78-82页 |
| ·菌株DSM 22428~T与六株参考菌株的DNA-DNA杂交 | 第82-87页 |
| ·菌株DSM 22428~T与C.israelensis DSM6768~T脂肪酸的测定 | 第87-88页 |
| ·菌株DSM 22428~T极性脂与呼吸醌的测定 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| ·本章小结 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
