猪嗜血支原体血液直接PCR方法的建立及抗猪嗜血支原体中药单体的体外筛选
摘要 | 第1-8页 |
前言 | 第8-18页 |
1 猪嗜血支原体的特性 | 第8-10页 |
·分类地位 | 第8页 |
·形态及染色特征 | 第8-9页 |
·培养特征 | 第9页 |
·理化特性 | 第9-10页 |
2 猪嗜血支原体的致病性 | 第10-12页 |
·概述 | 第10页 |
·流行病学 | 第10页 |
·发病机理 | 第10-11页 |
·临床症状 | 第11页 |
·病理剖检变化 | 第11页 |
·病理组织学变化 | 第11-12页 |
3 猪嗜血支原体的检测方法 | 第12-13页 |
·镜检法 | 第12页 |
·分子生物学方法 | 第12-13页 |
4 猪嗜血支原体病的治疗药物 | 第13-15页 |
·砷制剂 | 第13页 |
·抗血液原虫类药物 | 第13-14页 |
·抗生素类药物 | 第14页 |
·中药及其制剂 | 第14-15页 |
5 抗嗜血支原体药物筛选模型 | 第15-16页 |
·体外培养药物筛选法 | 第15-16页 |
·实验动物感染筛选法 | 第16页 |
6 研究目的和意义 | 第16-18页 |
材料与方法 | 第18-29页 |
1 材料 | 第18-22页 |
·猪只 | 第18页 |
·病原体 | 第18页 |
·PK-15猪肾细胞 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·试剂与耗材 | 第19页 |
·主要试剂的配制 | 第19-21页 |
·中药单体及对照药物 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-29页 |
·血液直接PCR的建立 | 第22-23页 |
·重组质粒标准品的制备 | 第23-25页 |
·中药单体的体外初步筛选 | 第25-27页 |
·中药单体对M.suis杀灭效果试验 | 第27-29页 |
结果 | 第29-40页 |
1 血液直接PCR的建立 | 第29-31页 |
·血液直接PCR扩增及特异性试验 | 第29页 |
·血液直接PCR目的片段测序 | 第29-30页 |
·血液直接PCR敏感性试验 | 第30-31页 |
·血液直接PCR与常规PCR的比较 | 第31页 |
2 重组质粒的构建 | 第31-32页 |
3 中药单体溶解试验 | 第32-33页 |
4 中药单体安全试验 | 第33页 |
5 药物对血液直接PCR的影响 | 第33-35页 |
6 中药单体初步筛选 | 第35-36页 |
7 qPCR扩增动力学曲线、标准曲线及熔解曲线 | 第36-38页 |
8 药物对M.suis杀灭作用结果 | 第38-40页 |
讨论 | 第40-45页 |
1 血液直接PCR | 第40页 |
2 M.suis体外培养 | 第40-41页 |
3 qPCR检测M.suis拷贝数 | 第41-42页 |
4 抗M.suis中药单体的体外筛选 | 第42-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
Abstract | 第51-53页 |
附录 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |