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粒细胞—巨细胞集落刺激因子膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗治疗转移性膀胱癌的实验研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-18页
目录第18-21页
第一章 前言第21-25页
第二章 膀胱癌干细胞的分离第25-32页
   ·实验材料与方法第25-28页
     ·实验材料第25-26页
     ·实验方法第26-28页
   ·研究结果第28-31页
     ·最佳无血清培养基筛选第28-30页
     ·MCSCs的无血清培养形成及传代第30-31页
   ·研究结论第31-32页
第三章 膀胱癌干细胞的鉴定第32-56页
   ·实验材料与方法第32-44页
     ·实验材料第32-35页
     ·实验方法第35-44页
     ·统计学分析第44页
   ·研究结果第44-55页
     ·检测膀胱癌干细胞的标志物第44-47页
       ·流式细胞术(FCM)第44-45页
       ·实时定量基因扩增荧光检测系统(qPCR)第45-46页
       ·Western蛋白免疫印迹(WB)第46-47页
     ·分化能力第47页
     ·膀胱癌干细胞功能学方面比较第47-55页
       ·体外细胞增殖能力(CCK8实验)第47-48页
       ·体外细胞软琼脂克隆形成能力第48-49页
       ·体外细胞侵袭能力(Transwell小室实验)第49页
       ·体外细胞对化疗药物的耐受能力第49-54页
       ·体内细胞成瘤实验第54-55页
   ·研究结论第55-56页
第四章 肿瘤干细胞疫苗的制备及其生物学活性的检测第56-62页
   ·实验材料与方法第56-59页
     ·实验材料第56-57页
     ·实验方法第57-59页
     ·统计学分析第59页
   ·研究结果第59-61页
     ·SA-GM-CSF双功能融合蛋白对MB49膀胱癌干细胞的锚定效率第59页
     ·锚定于MB49膀胱癌干细胞表面的SA-GM-CSF双功能融合蛋白的生物学活性检测第59-61页
   ·研究结论第61-62页
第五章 动物实验第62-86页
   ·实验材料与方法第62-68页
     ·实验材料第62-63页
     ·实验方法第63-68页
     ·统计学分析第68页
   ·研究结果第68-85页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗的预防性实验第68-71页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗的治疗性实验第71-73页
     ·肿瘤特异性毒性T淋巴细胞反应(CTL)第73-76页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗治疗后血清中IgG的含量第76-78页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗治疗后脾脏中成熟型DC细胞的含量第78-80页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗治疗后小鼠外周血中的T细胞亚群的变化第80-82页
     ·GM-CSF在皮下瘤模型的免疫组化表达第82页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗的免疫记忆实验第82-83页
     ·运用SA-GM-CSF膜修饰的MB49膀胱癌干细胞疫苗的免疫特异性实验第83-85页
   ·研究结论第85-86页
附录:彩图第86-95页
第六章 讨论第95-100页
第七章 全文总结第100-101页
参考文献第101-108页
缩略词表第108-109页
综述:膀胱癌干细胞筛选方法的研究进展第109-122页
 参考文献第117-122页
博士学位期间成果第122-123页
致谢第123-125页
附件第125页

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