| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-32页 |
| ·基因治疗药物研发概况 | 第10-11页 |
| ·血管生长基因治疗的研究进展 | 第11-15页 |
| ·血管生长基本生理过程 | 第11-12页 |
| ·血管生长基因治疗药物的研发概况 | 第12-13页 |
| ·血管生长基因载体系统研究与应用现状 | 第13-14页 |
| ·血管生长基因导入途径 | 第14-15页 |
| ·HGF基因治疗研究进展 | 第15-25页 |
| ·HGF研究概述 | 第15-21页 |
| ·HGF基因治疗肢体缺血性疾病的研究进展 | 第21-23页 |
| ·HGF基因治疗心脏缺血性疾病的研究进展 | 第23-24页 |
| ·HGF毒理安全性研究结果 | 第24-25页 |
| ·质粒制备工艺和质量标准研究进展 | 第25-29页 |
| ·制备工艺研究进展 | 第25-28页 |
| ·质量标准研究进展 | 第28-29页 |
| ·本论文的选题思路及主要工作 | 第29-32页 |
| ·选题思路 | 第29-31页 |
| ·主要工作 | 第31-32页 |
| 第二章 培养条件研究 | 第32-42页 |
| ·材料与仪器 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·基本摇瓶培养方法 | 第33页 |
| ·培养基对细菌生长及质粒产量的影响 | 第33-34页 |
| ·培养温度对细菌生长及质粒产量的影响 | 第34页 |
| ·摇床培养转速对细菌生长及质粒产量的影响 | 第34页 |
| ·质粒产量的检测方法 | 第34-35页 |
| ·菌体浓度与质量的检测方法 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-41页 |
| ·培养基对细菌生长及质粒产量的影响 | 第35-37页 |
| ·培养温度对细菌生长及质粒产量的影响 | 第37-39页 |
| ·摇床转速对细菌生长及质粒产量的影响 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第三章 发酵工艺研究 | 第42-57页 |
| ·材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·发酵种子液的制备 | 第43页 |
| ·发酵过程及监控 | 第43-44页 |
| ·培养基对发酵的影响 | 第44页 |
| ·接种量对发酵的影响 | 第44页 |
| ·发酵时间对发酵的影响 | 第44页 |
| ·菌体浓度与质量的检测方法 | 第44页 |
| ·质粒产量的检测方法 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-56页 |
| ·培养基对发酵的影响 | 第45-49页 |
| ·接种量对发酵的影响 | 第49-53页 |
| ·发酵时间对发酵的影响 | 第53-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 小试纯化工艺研究 | 第57-69页 |
| ·材料与仪器 | 第57-59页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57-58页 |
| ·主要耗材 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-63页 |
| ·纯化方法的确定 | 第59页 |
| ·整体纯化线路图 | 第59-60页 |
| ·整体纯化思路 | 第60-61页 |
| ·基本纯化方法 | 第61-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-67页 |
| ·破菌及澄清 | 第63页 |
| ·超滤浓缩 | 第63-64页 |
| ·第一步层析 | 第64-65页 |
| ·第二步层析 | 第65-66页 |
| ·第三步层析和超滤 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-69页 |
| 第五章 中试纯化工艺研究 | 第69-77页 |
| ·材料与仪器 | 第69-71页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·实验仪器 | 第69-70页 |
| ·主要耗材 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·主要溶液的配制 | 第71页 |
| ·菌体的破碎 | 第71页 |
| ·破菌液的澄清 | 第71页 |
| ·超滤浓缩 | 第71页 |
| ·第一步层析 | 第71-72页 |
| ·第二步层析 | 第72页 |
| ·第三步层析 | 第72页 |
| ·超滤浓缩 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-76页 |
| ·破菌、澄清和超滤浓缩 | 第72-73页 |
| ·第一步层析和第二步层析结果 | 第73-74页 |
| ·第三步层析和超滤 | 第74-75页 |
| ·中试纯化工艺的稳定性 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 第六章 重组人肝细胞生长因子裸质粒的质量标准 | 第77-88页 |
| ·材料与仪器 | 第77-78页 |
| ·实验材料 | 第77-78页 |
| ·实验仪器 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-80页 |
| ·质粒含量 | 第78-79页 |
| ·目的基因表达量检查 | 第79-80页 |
| ·目的基因表达产物生物活性检测 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-87页 |
| ·质粒含量 | 第80-83页 |
| ·目的基因表达量检查 | 第83-85页 |
| ·目的基因表达产物生物活性检测 | 第85-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 第七章 下肢缺血性疾病模型的治疗效果研究 | 第88-98页 |
| ·材料与仪器 | 第88页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·实验动物 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-92页 |
| ·兔下肢动脉性缺血模型 | 第88-90页 |
| ·动物分组与给药方法 | 第90页 |
| ·实验流程 | 第90-91页 |
| ·指标及其观察方法 | 第91-92页 |
| ·结果与讨论 | 第92-96页 |
| ·用选择性髂内动脉造影术，测定缺血部位侧支血管数量的结果 | 第92-94页 |
| ·缺血部位新生毛细血管密度的组织学观察结果 | 第94-95页 |
| ·多普勒测定髂内动脉血流量结果 | 第95-96页 |
| ·小结 | 第96-98页 |
| 第八章 结论与展望 | 第98-101页 |
| ·结论 | 第98-99页 |
| ·创新点 | 第99-100页 |
| ·展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-109页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111页 |