| 摘要 | 第1-9页 |
| 中英文缩略对照表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 1 骨骼肌简介 | 第12-13页 |
| ·骨骼肌的形成 | 第12-13页 |
| ·肌纤维的结构及分类 | 第13页 |
| 2 与骨骼肌发育相关的基因家族 | 第13-14页 |
| ·生肌调节因子家族(myogenic regulatory factors,MRFs) | 第14页 |
| ·肌细胞增强因子家族(myocyte enhancer factor2,MEF2) | 第14页 |
| 3 Myf5基因的研究进展 | 第14-19页 |
| ·Myf5基因的发现、定位及同源性分析 | 第14页 |
| ·Myf5蛋白的分子结构 | 第14-15页 |
| ·Myf5基因的相关研究 | 第15-19页 |
| ·Myf5基因多态性的研究 | 第15-16页 |
| ·Myf5基因在胚胎发育中作用的研究 | 第16页 |
| ·Myf5基因在动物个体肌肉中功能的研究 | 第16-19页 |
| 试验一 马身猪Myf5基因CDS区扩增及生物信息学分析 | 第19-27页 |
| 1 材料与方法 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-20页 |
| ·引物设计与合成 | 第19页 |
| ·Myf5基因CDS区的PCR扩增 | 第19-20页 |
| ·Myf5基因CDS区的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2 结果与分析 | 第20-25页 |
| ·PCR条件的优化 | 第20页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第20-21页 |
| ·马身猪Myf5基因CDS区测序及分析 | 第21-22页 |
| ·马身猪Myf5蛋白的生物信息学分析 | 第22-25页 |
| ·马身猪Myf5蛋白基本性质分析 | 第22页 |
| ·Myf5蛋白磷酸化位点和糖基化位点预测 | 第22-24页 |
| ·Myf5蛋白的二级结构预测 | 第24页 |
| ·Myf5蛋白的三级结构 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-27页 |
| ·关于基因CDS区扩增测序的讨论 | 第25页 |
| ·关于马身猪Myf5基因CDS区的讨论 | 第25-27页 |
| 试验二 马身猪和大白猪Myf5基因mRNA相对丰度分析 | 第27-38页 |
| 1 材料与方法 | 第27-31页 |
| ·试验动物及组织 | 第27页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-31页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·RNA的检测 | 第28-29页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第29页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·RTFQ-PCR反应体系及反应条件优化 | 第29-30页 |
| ·标准曲线的制作 | 第30页 |
| ·关于Myf5基因的RTFQ-PCR试验 | 第30页 |
| ·数据处理和分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·标准曲线的建立 | 第31-32页 |
| ·扩增动力学曲线 | 第32-33页 |
| ·样品扩增熔解曲线 | 第33页 |
| ·Myf5基因mRNA的相对丰度分析 | 第33-35页 |
| ·马身猪和大白猪不同组织Myf5基因mRNA的相对丰度分析 | 第33-34页 |
| ·马身猪和大白猪背最长肌组织Myf5基因mRNA的相对丰度分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-38页 |
| ·关于实时荧光定量PCR的讨论 | 第35-36页 |
| ·关于马身猪和大白猪Myf5基因mRNA的相对丰度的讨论 | 第36-37页 |
| ·关于猪背最长肌组织中M;//5基因mRNA的相对丰度的讨论 | 第37-38页 |
| 试验三 不同日龄马身猪和大白猪Myf5蛋白表达分析 | 第38-50页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·试验动物及材料 | 第38页 |
| ·试验仪器及试剂 | 第38-40页 |
| ·试验仪器 | 第38-39页 |
| ·试验试剂及配方 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-44页 |
| ·组织蛋白样的制备 | 第40-41页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第41页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
| ·转膜 | 第42-43页 |
| ·免疫反应 | 第43页 |
| ·ECL化学发光检测 | 第43页 |
| ·图片处理及分析 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-47页 |
| ·SDS-聚丙烯凝胶电泳效果的检测 | 第44页 |
| ·western-blot结果及分析 | 第44-47页 |
| ·马身猪和大白猪不同组织Myf5蛋白的相对表达分析 | 第44-46页 |
| ·不同日龄马身猪和大白猪背最长肌组织中Myf5蛋白的相对表达分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-50页 |
| ·关于western-blot实验技术的讨论 | 第47-49页 |
| ·Myf5蛋白在马身猪和大白猪肌肉组织中表达探讨 | 第49-50页 |
| 全文总结及结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| Abstract | 第55-56页 |
| 附录1 Myf5基因cDNA测序结果 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
