中文摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-6页 |
引言 | 第6-8页 |
第一章 实验材料 | 第8-10页 |
·主要试剂与材料 | 第8-9页 |
·细胞株:永生化人角质形成细胞(HaCaT),上海细胞库 | 第9页 |
·仪器设备 | 第9-10页 |
第二章 实验方法 | 第10-21页 |
·实验设计与模型建立 | 第10页 |
·人HaCaT角质形成细胞的传代培养 | 第10页 |
·实验分组及UVB照射 | 第10页 |
·CCK8筛选UVB辐射诱导HaCaT细胞恶性转化的剂量 | 第10页 |
·实验项目及检测指标 | 第10-20页 |
·细胞形态学染色观察 | 第10-11页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第11页 |
·软琼脂集落形成实验 | 第11-12页 |
·明胶酶谱检测MMP-9 | 第12-13页 |
·平板集落形成实验 | 第13页 |
·高分辨率溶解曲线检测基因启动子甲基化 | 第13-15页 |
·RT-PCR | 第15-18页 |
·免疫印迹Western blot | 第18-20页 |
·统计学处理 | 第20-21页 |
第三章 实验结果 | 第21-37页 |
·UVB诱导HaCaT细胞恶性转化单次辐射剂量的筛选 | 第21页 |
·UVB辐射对HaCaT细胞形态学的影响 | 第21页 |
·UVB辐射对HaCaT细胞软琼脂克隆形成率的影响 | 第21-22页 |
·UVB辐射对HaCaT细胞MMP-9分泌的影响 | 第22页 |
·PCF对UVB诱导的HaCaT细胞恶性转化的影响 | 第22-23页 |
·PCF对UVB辐射诱导的HaCaT细胞平板集落形成率的影响 | 第22页 |
·PCF对UVB辐射诱导的HaCaT细胞软琼脂克隆形成率的影响 | 第22-23页 |
·PCF对UVB辐射诱导的HaCaT细胞周期的影响 | 第23页 |
·PCF对UVB辐射诱导的HaCaT细胞P16和RASSF1A基因甲基化的影响 | 第23页 |
·UVB辐射HaCaT细胞内DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达的经时变化 | 第23-24页 |
·UVB辐射HaCaT细胞内P16、RASSF1A、DNMT3b、GADD45a蛋白表达的经时变化 | 第24页 |
·PCF对UVB辐射HaCaT细胞内P16、RASSF1A、DNMT3b、GADD45a蛋白表达的影响 | 第24-26页 |
·附图 | 第26-37页 |
第四章 讨论 | 第37-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
综述 | 第54-76页 |
综述的参考文献 | 第66-76页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |