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叶片衰老抑制基因PSAG12-ITP转化小麦的研究

第一章 文献综述 小麦转基因及叶片衰老调控研究进展第1-39页
 1 小麦转基因研究第12-30页
  1.1 小麦转基因研究的历史第12-13页
  1.2 小麦转基因的转化体系研究第13-14页
  1.3 小麦转基因的受体系统研究第14-15页
   1.3.1 原生质体第14页
   1.3.2 胚性愈伤组织第14-15页
   1.3.3 雌蕊第15页
  1.4 小麦遗传转化的目标基因研究第15-17页
   1.4.1 报告基因第15-16页
   1.4.2 功能基因第16-17页
   1.4.3 部分或全部基因组第17页
  1.5 小麦转基因的方法第17-24页
   1.5.1 根癌农杆菌介导法第18-20页
   1.5.2 基因枪法第20-21页
   1.5.3 花粉管通道法第21-23页
   1.5.4 其它直接转化方法第23-24页
  1.6 筛选方法研究第24-25页
  1.7 小麦转基因植株的鉴定第25页
  1.8 外源基因在植物基因组中的整合第25-26页
   1.8.1 整合位点与拷贝数第25-26页
   1.8.2 外源基因的整合方式第26页
  1.9 外源基因的表达第26-28页
   1.9.1 影响外源基因表达的因素第26-28页
   1.9.2 提高外源基因表达的策略第28页
  1.10 转基因小麦的遗传行为第28-29页
  1.11 小麦转基因存在的主要问题第29-30页
 2 小麦叶片衰老及其调控研究第30-37页
  2.1 小麦叶片衰老的形态和生理指标第30页
   2.1.1 叶片衰老的形态指标第30页
   2.1.2 叶片衰老的生理指标第30页
  2.2 小麦叶片衰老过程中的生理生化变化第30-31页
  2.3 影响小麦叶片衰老的因素第31-33页
   2.3.1 外界因素第31-32页
   2.3.2 自主调节因子第32-33页
  2.4 叶片衰老的机理第33页
  2.5 叶片衰老相关基因第33-34页
  2.6 细胞分裂素在延缓叶片衰老中的作用第34-35页
  2.7 叶片衰老的调控第35-37页
   2.7.1 常规育种途径第35-36页
   2.7.2 作物栽培途径第36页
   2.7.3 基因工程途径第36-37页
 3 研究的目的和意义第37-38页
 4 研究的整体方案第38页
 5 预期目标及新见解第38-39页
第二章 利用农杆菌浸泡种子法将叶片衰老抑制基因P-(SAG12)-IPT导入普通小麦的研究第39-50页
 1 材料与方法第39-46页
  1.1 材料第39-40页
   1.1.1 小麦品种第39-40页
   1.1.2 农杆菌菌株第40页
   1.1.3 转化载体第40页
   1.1.4 试验所用培养基第40页
  1.2 方法第40-46页
   1.2.1 小麦种子准备第40页
   1.2.2 农杆菌准备第40页
   1.2.3 农杆菌浸泡转化第40页
   1.2.4 转基因植株的分子检测第40-44页
   1.2.5 GUS基因表达的组织化学法检测第44页
   1.2.6 转基因植株的表达分析第44-45页
   1.2.7 转基因植株后代(T_1)的遗传分析第45-46页
 2 结果与分析第46-49页
  2.1 转基因植株的PCR和GUS检测第46页
  2.2 转基因植株的Southern杂交验证第46-47页
  2.3 转基因植株叶片细胞分裂素含量、叶绿素含量及衰老程度分析第47-48页
  2.4 转基因植株农艺性状分析发第48页
  2.5 转基因植株后代(T_1)分析第48-49页
 3 小结第49-50页
第三章 利用农杆菌常规介导法将叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT导入普通小麦的研究第50-56页
 1 材料与方法第50-52页
  1.1 实验材料第50-51页
   1.1.1 供试品种第50页
   1.1.2 农杆菌菌株第50页
   1.1.3 转化载体第50页
   1.1.4 试验所用培养基第50-51页
  1.2 方法第51-52页
   1.2.1 小麦外植体的准备第51页
   1.2.2 潮霉素(Hn)有效筛选浓度的试验第51-52页
   1.2.3 分化培养基的筛选试验第52页
   1.2.4 农杆菌的准备第52页
   1.2.5 农杆菌转化第52页
 2 结果与分析第52-55页
  2.1 胚性愈伤的获得第52-53页
  2.2 西农1376和京花1号愈伤组织对潮霉素的敏感性第53-54页
  2.3 分化培养基的筛选结果第54页
  2.4 抗性愈伤的获得第54-55页
 3 小结第55-56页
第四章 利用花粉管通道法将叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT导入普通小麦的研究第56-65页
 1 材料与方法第56-60页
  1.1 实验材料第56-57页
   1.1.1 供试品种第56页
   1.1.2 菌株第56-57页
   1.1.3 质粒第57页
   1.1.4 试验所用培养基第57页
  1.2 方法第57-60页
   1.2.1 质粒DNA的小量提取第57-58页
   1.2.2 质粒DNA转化大肠杆菌第58页
   1.2.3 质粒DNA的大量制备第58-59页
   1.2.4 质粒DNA的纯化第59页
   1.2.5 花粉管通道方法转化西农1376第59-60页
   1.2.6 点杂交第60页
   1.2.7 PCR,GUS,Southern杂交检测、表达及后代遗传分析第60页
 2 结果与分析第60-64页
  2.1 转基因植株的PCR和GUS检测第60-61页
  2.2 转基因植株的点杂交和Southern杂交验证第61-62页
  2.3 转基因植株的叶片细胞分裂素含量、叶绿素含量及衰老程度分析第62-63页
  2.4 转基因植株农艺性状分析第63-64页
  2.5 转基因植株后代(T_1)遗传分析第64页
 3 小结第64-65页
第五章 卡那霉素在转基因小麦后代筛选中的应用研究第65-69页
 1 材料与方法第65-66页
  1.1 实验材料第65页
   1.1.1 供试材料第65页
   1.1.2 筛选液成分第65页
  1.2 实验方法第65-66页
   1.2.1 卡那霉素有效筛选浓度试验第65页
   1.2.2 T_1代西农1376卡那霉素抗性苗的PCR检测第65-66页
 2 结果与分析第66-68页
  2.1 西农1376和西农2611对卡那霉素的敏感性第66-67页
  2.2 T_1代西农1376卡那霉素抗性苗的PCR检测第67-68页
 3 小结第68-69页
第六章 讨论第69-73页
 1 农杆菌浸泡种子法转化小麦的可行性第69页
 2 质粒DNA浓度对花粉管通道法转化效率的影响第69-70页
 3 农杆菌介导法中小麦植株的再生第70-71页
 4 叶片衰老抑制基因P_SAG12-IPT在小麦中的表现第71-72页
 5 卡那霉素在转基因小麦后代筛选中的应用第72-73页
第七章 结论第73-75页
 1 农杆菌浸泡种子法获得转基因小麦第73页
 2 农杆菌常规介导法转化小麦第73页
 3 叶片衰老抑制基因P_SAG12—IPT通过花粉管途径导入小麦第73-74页
 4 卡那霉素筛选体系的建立第74-75页
参考文献第75-87页
作者简介第87-88页
致谢第88页

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