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谷氨酸棒杆菌L-天冬氨酸α-脱羧酶催化性能的定点突变分子改造

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 绪论第9-15页
   ·酶蛋白的分子改造第9-10页
     ·酶的蛋白质工程第9-10页
     ·酶的定点突变设计第10页
   ·L-天冬氨酸 -脱羧酶第10-13页
     ·L-天冬氨酸 -脱羧酶的来源及性质第10-11页
     ·L-天冬氨酸 -脱羧酶的应用第11-12页
     ·L-天冬氨酸 -脱羧酶的研究进展第12-13页
   ·本课题的立题意义和研究内容第13-15页
     ·立题意义第13-14页
     ·本课题的主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-25页
   ·实验材料第15-18页
     ·菌株与质粒第15页
     ·培养基第15页
     ·工具酶及主要试剂第15页
     ·主要仪器第15-18页
   ·实验方法第18-25页
     ·重组蛋白的分离纯化及酶学性质分析第18-20页
     ·突变位点的设计第20-21页
     ·突变子的构建与鉴定第21-24页
     ·突变子性能比较和结构分析第24-25页
第三章 结果与讨论第25-42页
   ·重组 L-天冬氨酸 -脱羧酶的纯化及酶学性质研究第25-31页
     ·ADC 酶活力检测方法的确立第25-26页
     ·温度、pH 对酶活力和稳定性的影响第26-27页
     ·重组 L-天冬氨酸 -脱羧酶的纯化第27-29页
     ·底物抑制参数及酶活抑制情况第29-30页
     ·酶转化脱羧反应的转化率第30-31页
   ·突变酶的设计及突变预测第31-33页
     ·序列比对和结构分析第31-32页
     ·突变效果的分析预测第32-33页
   ·突变酶的分离纯化和酶学性质研究第33-38页
     ·突变酶的分离纯化第33-34页
     ·突变酶的酶活情况比较第34-37页
     ·pH、温度对突变酶酶活、稳定性的影响第37页
     ·突变酶的动力学参数比较第37-38页
   ·定点突变设计与结果的对比分析第38-42页
     ·ΔGly65 突变分析第38页
     ·Ile5Met、Asp19Asn 突变分析第38-39页
     ·Ile86Trp、Lys9Ser 突变分析第39页
     ·Lys9Arg 突变分析第39-42页
主要结论与展望第42-43页
 主要结论第42页
 展望第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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