| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·研究背景 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-18页 |
| ·软骨细胞凋亡 | 第12-16页 |
| ·线粒体凋亡通路 | 第12-14页 |
| ·死亡受体通路 | 第14-15页 |
| ·内质网应激 | 第15-16页 |
| ·基因沉默技术的应用 | 第16-18页 |
| ·siRNA与miRNA的区别与联系 | 第16-17页 |
| ·RNAi的特征 | 第17页 |
| ·RNAi的合成及导入方法 | 第17页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第17-18页 |
| ·本课题研究思路 | 第18-19页 |
| ·研究目标 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-30页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·实验用药 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·溶液配制 | 第22页 |
| ·软骨细胞的采集 | 第22-23页 |
| ·软骨细胞的鉴定 | 第23-24页 |
| ·细胞爬片 | 第23页 |
| ·软骨细胞H.E染色 | 第23-24页 |
| ·软骨细胞阿利辛蓝和甲苯氨蓝染色 | 第24页 |
| ·软骨细胞的Ⅱ型胶原免疫组织化学染色 | 第24页 |
| ·MTT法检测细胞的活力 | 第24-25页 |
| ·Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡率 | 第25页 |
| ·RT-PCR检测TNFR通路关键基因的mRNA表达水平 | 第25-27页 |
| ·细胞加药处理 | 第25-26页 |
| ·总RNA的提取及质量检测 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第26-27页 |
| ·Western blot检测TNF/TNFR1的磷酸化水平 | 第27-29页 |
| ·TNFR1-siRNA干扰 | 第29页 |
| ·统计学分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-39页 |
| ·软骨细胞培养 | 第30页 |
| ·软骨细胞的鉴定 | 第30-31页 |
| ·软骨细胞活性的变化情况 | 第31-32页 |
| ·软骨细胞凋亡率的变化情况 | 第32-33页 |
| ·RNA质量的鉴定 | 第33-34页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对TNFR信号通路相关基因mRNA水平的影响 | 第34-35页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对TNF-α/TNFR1蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| ·TNFR1-siRNA干扰 | 第36-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| ·软骨细胞培养及鉴定 | 第39-40页 |
| ·药物浓度和取样检测时间点的选择 | 第40-42页 |
| ·QNs诱导TNFR信号通路的激活 | 第42-44页 |
| 5 全文总结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-54页 |
| 附录 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
