| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一部分：实验部分 | 第13-41页 |
| 第一章 胎儿成纤维细胞转染条件的优化 | 第13-20页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| ·化学试剂与实验材料 | 第13-14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14-15页 |
| ·绒山羊胎儿成纤维细胞的分离、培养 | 第14页 |
| ·脂质体法转染绒山羊胎儿成纤维细胞 | 第14-15页 |
| ·脂质体法转染条件的优化 | 第15页 |
| 3 结果 | 第15-17页 |
| ·山羊胎儿成纤维细胞的分离、培养 | 第15-16页 |
| ·脂质体法转染条件的优化 | 第16-17页 |
| 4 讨论 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-20页 |
| 第二章 利用TALENs技术制备MSTN基因敲除的绒山羊胎儿成纤维细胞 | 第20-34页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| ·化学试剂与实验材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-25页 |
| ·TALENs表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·荧光素酶检测载体对靶位点的切割效率 | 第23页 |
| ·TALENs表达载体的质量检测 | 第23页 |
| ·脂质体法转染阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞 | 第23-24页 |
| ·单克隆细胞系的获得 | 第24页 |
| ·单克隆细胞系基因组的提取 | 第24页 |
| ·阳性单克隆细胞系的鉴定 | 第24-25页 |
| ·双等位基因敲除细胞系染色体数目分析 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-31页 |
| ·TALENs表达载体的构建 | 第25-27页 |
| ·荧光素酶检测结果 | 第27页 |
| ·TALENs表达载体的质量检测 | 第27页 |
| ·单克隆细胞系的获得 | 第27-28页 |
| ·阳性单克隆细胞系的鉴定 | 第28-30页 |
| ·双敲细胞系的染色体数目分析 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第三章 MSTN基因敲除细胞系的核移植 | 第34-40页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·化学试剂与实验材料 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-36页 |
| ·卵母细胞的成熟培养 | 第35页 |
| ·供体细胞的准备 | 第35页 |
| ·核移植 | 第35页 |
| ·电融合 | 第35-36页 |
| ·重构胚的激活 | 第36页 |
| ·克隆胚胎的体外培养 | 第36页 |
| ·克隆胚胎移植及妊娠检查 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-38页 |
| ·供体细胞的比较 | 第36-37页 |
| ·MSTN~(-/-)克隆胚胎的发育能力检测 | 第37页 |
| ·克隆胚胎移植及妊娠检查 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 第二部分：综述部分 | 第41-54页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第55页 |