致谢 | 第1-5页 |
项目资助 | 第5-11页 |
摘要 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-21页 |
·miRNA 的简介和鉴定 | 第12页 |
·miRNA 的发现 | 第12页 |
·miRNA 的鉴定 | 第12页 |
·miRNA 调控基因表达的机制 | 第12-13页 |
·翻译抑制 | 第12-13页 |
·miRNA 介导 mRNA 降解 | 第13页 |
·SG(Stress Granules)颗粒 | 第13页 |
·miRNA 的表达调控 | 第13-14页 |
·RNA 编辑 | 第13页 |
·特异性增强子介导 | 第13-14页 |
·miRNA 的功能 | 第14-15页 |
·miRNA 调控动物的发育时序 | 第14页 |
·miRNA 调控细胞的分化、增殖与凋亡 | 第14页 |
·miRNA 在动物脂肪代谢中的功能 | 第14页 |
·miRNA 与病毒感染宿主动物 | 第14-15页 |
·miRNA 表达检测 | 第15-16页 |
·高通量测序 | 第15页 |
·实时定量 PCR 技术 | 第15-16页 |
·Northern blot 分析 | 第16页 |
·miRNA 靶基因的研究 | 第16-17页 |
·miRNA 靶基因的生物信息学预测 | 第16-17页 |
·miRNA 靶基因的鉴定 | 第17页 |
·let-7a | 第17-18页 |
·let-7a 简介 | 第17页 |
·let-7a 的表达特征 | 第17页 |
·let-7a 的功能 | 第17-18页 |
·靶基因遗传效应的研究 | 第18-19页 |
·单核苷酸多态性(SNPs) | 第18页 |
·SNPs 检测方法 | 第18-19页 |
·脂联素受体 2 | 第19-21页 |
·脂联素受体 2 的发现、结构、功能 | 第19页 |
·脂联素受体 2 的表达 | 第19-21页 |
2 引言 | 第21-22页 |
3 鸡 let-7a 的组织表达谱和生物信息学分析 | 第22-32页 |
·试验材料 | 第22页 |
·试验样品 | 第22页 |
·主要试验试剂及溶液配制 | 第22页 |
·试验仪器 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-24页 |
·总 RNA 提取 | 第22-23页 |
·RNA 质量的检测 | 第23页 |
·实时荧光定量 PCR | 第23页 |
·let-7a 标准曲线制作和绝对定量 | 第23页 |
·靶基因预测 | 第23-24页 |
·结果与分析 | 第24-29页 |
·RNA 质量的检测 | 第24页 |
·let-7a 实时定量 PCR 检测试剂盒的特异性 | 第24页 |
·let-7a 标准曲线 | 第24-25页 |
·let-7a 的绝对定量与组织表达谱 | 第25-26页 |
·let-7a 靶基因的生物信息学分析 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
·关于实时定量 PCR 技术 | 第29页 |
·let-7a 的组织表达分析 | 第29页 |
·let-7a 功能分析 | 第29-30页 |
·脂源性细胞因子通路 | 第30页 |
·生物信息学预测靶基因的准确性 | 第30-31页 |
·小结 | 第31-32页 |
4 let-7a 与其靶基因 ADIPOR2 在鸡不同组织中表达关系的研究 | 第32-37页 |
·试验材料 | 第32页 |
·试验样品 | 第32页 |
·主要试验试剂及溶液配制 | 第32页 |
·试验仪器 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-34页 |
·总 RNA 提取 | 第32页 |
·RNA 质量的检测 | 第32页 |
·反转录 | 第32-33页 |
·cDNA 质量的检测 | 第33页 |
·荧光定量 PCR 引物设计 | 第33页 |
·荧光定量 PCR 反应操作步骤 | 第33页 |
·数据处理 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-36页 |
·cDNA 质量及引物特异性检测 | 第34页 |
·ADIPOR2 在鸡不同发育阶段各组织中的表达 | 第34-35页 |
·ADIPOR2 与 let-7a 在各组织中的表达关系分析 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36页 |
·鸡 ADIPOR2 基因组织表达特征 | 第36页 |
·ADIPOR2 基因与 let-7a 的表达关系 | 第36页 |
·小结 | 第36-37页 |
5 let-7a 潜在靶基因 ADIPOR2 的遗传变异研究 | 第37-50页 |
·试验材料 | 第37-38页 |
·DNA 样 | 第37页 |
·屠宰指标数据 | 第37-38页 |
·试验主要试剂与溶液配制 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·试验方法 | 第38-41页 |
·DNA 混池的构建 | 第38页 |
·筛选 SNP 位点 | 第38-39页 |
·酶切引物及内切酶的选择 | 第39-40页 |
·PCR 扩增 | 第40页 |
·PCR 产物的检测 | 第40页 |
·PCR 产物的酶切反应 | 第40页 |
·酶切产物的检测 | 第40页 |
·测序验证 | 第40页 |
·统计分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-48页 |
·鸡 ADIPOR2 基因筛选突变结果 | 第41页 |
·鸡 ADIPOR2 基因各突变位点 PCR 扩增结果 | 第41页 |
·鸡 ADIPOR2 基因 g.34490C>T 位点酶切结果与分析 | 第41-42页 |
·鸡 ADIPOR2 基因 g.35363T>C 位点酶切结果与分析 | 第42页 |
·群体样本含量、基因型频率及等位基因频率分析 | 第42-43页 |
·群体遗传特性分析 | 第43页 |
·ADIPOR2 基因 SNP 位点与生产性状的关联分析 | 第43-45页 |
·ADIPOR2 基因加性效应与显性效应分析 | 第45-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·ADIPOR2 基因 g.34490C>T 位点关联分析 | 第48页 |
·ADIPOR2 基因 g.35363T>C 位点关联分析 | 第48-49页 |
·ADIPOR2 的 SNP 对 miRNA 的影响 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
6 结论及需进一步研究的内容 | 第50-51页 |
·结论 | 第50页 |
·需进一步开展的工作 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
ABSTRACT | 第57-58页 |