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鸡let-7a的组织表达、功能预测及其靶基因ADIPOR2遗传效应分析

致谢第1-5页
项目资助第5-11页
摘要第11-12页
1 文献综述第12-21页
   ·miRNA 的简介和鉴定第12页
     ·miRNA 的发现第12页
     ·miRNA 的鉴定第12页
   ·miRNA 调控基因表达的机制第12-13页
     ·翻译抑制第12-13页
     ·miRNA 介导 mRNA 降解第13页
     ·SG(Stress Granules)颗粒第13页
   ·miRNA 的表达调控第13-14页
     ·RNA 编辑第13页
     ·特异性增强子介导第13-14页
   ·miRNA 的功能第14-15页
     ·miRNA 调控动物的发育时序第14页
     ·miRNA 调控细胞的分化、增殖与凋亡第14页
     ·miRNA 在动物脂肪代谢中的功能第14页
     ·miRNA 与病毒感染宿主动物第14-15页
   ·miRNA 表达检测第15-16页
     ·高通量测序第15页
     ·实时定量 PCR 技术第15-16页
     ·Northern blot 分析第16页
   ·miRNA 靶基因的研究第16-17页
     ·miRNA 靶基因的生物信息学预测第16-17页
     ·miRNA 靶基因的鉴定第17页
   ·let-7a第17-18页
     ·let-7a 简介第17页
     ·let-7a 的表达特征第17页
     ·let-7a 的功能第17-18页
   ·靶基因遗传效应的研究第18-19页
     ·单核苷酸多态性(SNPs)第18页
     ·SNPs 检测方法第18-19页
   ·脂联素受体 2第19-21页
     ·脂联素受体 2 的发现、结构、功能第19页
     ·脂联素受体 2 的表达第19-21页
2 引言第21-22页
3 鸡 let-7a 的组织表达谱和生物信息学分析第22-32页
   ·试验材料第22页
     ·试验样品第22页
     ·主要试验试剂及溶液配制第22页
     ·试验仪器第22页
   ·试验方法第22-24页
     ·总 RNA 提取第22-23页
     ·RNA 质量的检测第23页
     ·实时荧光定量 PCR第23页
     ·let-7a 标准曲线制作和绝对定量第23页
     ·靶基因预测第23-24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·RNA 质量的检测第24页
     ·let-7a 实时定量 PCR 检测试剂盒的特异性第24页
     ·let-7a 标准曲线第24-25页
     ·let-7a 的绝对定量与组织表达谱第25-26页
     ·let-7a 靶基因的生物信息学分析第26-29页
   ·讨论第29-31页
     ·关于实时定量 PCR 技术第29页
     ·let-7a 的组织表达分析第29页
     ·let-7a 功能分析第29-30页
     ·脂源性细胞因子通路第30页
     ·生物信息学预测靶基因的准确性第30-31页
   ·小结第31-32页
4 let-7a 与其靶基因 ADIPOR2 在鸡不同组织中表达关系的研究第32-37页
   ·试验材料第32页
     ·试验样品第32页
     ·主要试验试剂及溶液配制第32页
     ·试验仪器第32页
   ·试验方法第32-34页
     ·总 RNA 提取第32页
     ·RNA 质量的检测第32页
     ·反转录第32-33页
     ·cDNA 质量的检测第33页
     ·荧光定量 PCR 引物设计第33页
     ·荧光定量 PCR 反应操作步骤第33页
     ·数据处理第33-34页
   ·结果与分析第34-36页
     ·cDNA 质量及引物特异性检测第34页
     ·ADIPOR2 在鸡不同发育阶段各组织中的表达第34-35页
     ·ADIPOR2 与 let-7a 在各组织中的表达关系分析第35-36页
   ·讨论第36页
     ·鸡 ADIPOR2 基因组织表达特征第36页
     ·ADIPOR2 基因与 let-7a 的表达关系第36页
   ·小结第36-37页
5 let-7a 潜在靶基因 ADIPOR2 的遗传变异研究第37-50页
   ·试验材料第37-38页
     ·DNA 样第37页
     ·屠宰指标数据第37-38页
     ·试验主要试剂与溶液配制第38页
     ·主要仪器第38页
   ·试验方法第38-41页
     ·DNA 混池的构建第38页
     ·筛选 SNP 位点第38-39页
     ·酶切引物及内切酶的选择第39-40页
     ·PCR 扩增第40页
     ·PCR 产物的检测第40页
     ·PCR 产物的酶切反应第40页
     ·酶切产物的检测第40页
     ·测序验证第40页
     ·统计分析第40-41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·鸡 ADIPOR2 基因筛选突变结果第41页
     ·鸡 ADIPOR2 基因各突变位点 PCR 扩增结果第41页
     ·鸡 ADIPOR2 基因 g.34490C>T 位点酶切结果与分析第41-42页
     ·鸡 ADIPOR2 基因 g.35363T>C 位点酶切结果与分析第42页
     ·群体样本含量、基因型频率及等位基因频率分析第42-43页
     ·群体遗传特性分析第43页
     ·ADIPOR2 基因 SNP 位点与生产性状的关联分析第43-45页
     ·ADIPOR2 基因加性效应与显性效应分析第45-48页
   ·讨论第48-49页
     ·ADIPOR2 基因 g.34490C>T 位点关联分析第48页
     ·ADIPOR2 基因 g.35363T>C 位点关联分析第48-49页
     ·ADIPOR2 的 SNP 对 miRNA 的影响第49页
   ·小结第49-50页
6 结论及需进一步研究的内容第50-51页
   ·结论第50页
   ·需进一步开展的工作第50-51页
参考文献第51-57页
ABSTRACT第57-58页

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