| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 第一部分 人源降钙素类似物的生物制备 | 第14-43页 |
| 第1章 前言 | 第14-23页 |
| 1 降钙素 | 第14页 |
| 2 降钙素的结构 | 第14-16页 |
| 3 降钙素的临床应用 | 第16-17页 |
| 4 降钙素生物制备的研究进展 | 第17-19页 |
| ·提取法 | 第17页 |
| ·化学合成法 | 第17页 |
| ·基因工程法 | 第17-19页 |
| 5 蛋白质的体外环化 | 第19-20页 |
| 6 创新点及研究意义 | 第20-21页 |
| 7 实验设计 | 第21-23页 |
| 第2章 人源降钙素类似物的生物制备 | 第23-37页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第23-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-29页 |
| ·感受态的制备及质粒转化 | 第24页 |
| ·质粒的构建 | 第24-27页 |
| ·诱导表达 | 第27页 |
| ·破菌 | 第27-28页 |
| ·亲和纯化 | 第28页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第28页 |
| ·HPLC-MS鉴定 | 第28-29页 |
| ·冷冻干燥 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-36页 |
| ·人源降钙素类似物chCalcitonin(△AP)的制备 | 第29-30页 |
| ·chCalcitonin(△AP)融合蛋白的快速诱导表达 | 第30-31页 |
| ·chCalcitonin(△AP)融合蛋白剪接条件的摸索 | 第31-32页 |
| ·chCalcitonin(△AP)的大量制备 | 第32-33页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第33-34页 |
| ·人源降钙素类似物chCalcitonin(△AP)的HPLC-MS鉴定 | 第34-36页 |
| 4 结论与讨论 | 第36-37页 |
| ·结论 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第3章 人源降钙素类似物hCalcitonin表达条件的优化 | 第37-43页 |
| 1 实验结果 | 第37-42页 |
| ·pTWIN1-hc克隆构建及鉴定 | 第37-38页 |
| ·hCalcitonin融合蛋白的快速诱导表达 | 第38-39页 |
| ·hCalcitonin融合蛋白表达条件的优化 | 第39-42页 |
| 2 结论 | 第42-43页 |
| 第二部分 MIP融合蛋白包含体复性条件优化 | 第43-70页 |
| 第1章 前言 | 第43-54页 |
| 1 胰岛素药物的研究进展 | 第43-45页 |
| 2 包含体的研究进展 | 第45-52页 |
| ·包含体的性质 | 第45页 |
| ·包含体重折叠机理 | 第45-46页 |
| ·包含体复性条件的研究进展 | 第46-52页 |
| 3 创新点及意义 | 第52-53页 |
| 4 实验设计 | 第53-54页 |
| 第2章 MIP融合蛋白包含体复性方法的研究 | 第54-70页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第54-55页 |
| ·菌株和质粒 | 第54页 |
| ·主要生化试剂 | 第54页 |
| ·仪器 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-57页 |
| ·pTWIN1-MIP的转化 | 第55页 |
| ·MIP融合蛋白的诱导表达 | 第55页 |
| ·超声破菌 | 第55页 |
| ·变复性实验 | 第55-56页 |
| ·MIP融合蛋白的亲和纯化 | 第56页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第56-57页 |
| 3 实验结果 | 第57-69页 |
| ·MIP融合蛋白包含体复性实验结果分析 | 第57-58页 |
| ·MIP融合蛋白包含体复性条件优化实验结果分析 | 第58-69页 |
| 4 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
