| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 中英文縮写对照表 | 第13-14页 |
| 第一章 动物转基因研究进展 | 第14-26页 |
| 1 前言 | 第14页 |
| 2 动物转基因技术的发展概况 | 第14-15页 |
| 3 转基因动物制备方法 | 第15-22页 |
| ·原核显微注射法 | 第15-16页 |
| ·逆转录病毒感染法 | 第16-17页 |
| ·胚胎干细胞介导法 | 第17-18页 |
| ·精子载体法 | 第18-19页 |
| ·体细胞核移植法 | 第19页 |
| ·性腺注射转基因法 | 第19-20页 |
| ·RNA干涉法 | 第20-21页 |
| ·基因打靶结合克隆法 | 第21-22页 |
| 4 转基因动物的鉴定 | 第22-23页 |
| ·转基因整合检测 | 第22-23页 |
| ·转基因表达检测 | 第23页 |
| 5 转基因技术在畜牧生产方面的应用 | 第23-24页 |
| ·提高生产性能 | 第23-24页 |
| ·抗逆新品种(系)的培育 | 第24页 |
| 6 转基因技术对畜牧生产领域的发展前景 | 第24-25页 |
| 7 目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 肌肉和肝脏组织特异性启动子活性分析 | 第26-47页 |
| 1 前言 | 第26-27页 |
| 2 试验材料 | 第27-30页 |
| ·主要的仪器设备 | 第27页 |
| ·主要试剂和药品 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·主要生物学软件 | 第29页 |
| ·载体和菌种 | 第29-30页 |
| 3 试验方法和步骤 | 第30-39页 |
| ·猪CAPN3基因和TTR基因启动子的PCR扩增 | 第30-34页 |
| ·荧光检测载体制备及酶切鉴定 | 第34-36页 |
| ·启动子活性测定 | 第36-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·猪CAPN3启动子的克隆及功能分析 | 第39-42页 |
| ·转染细胞荧光活性的检测 | 第42-43页 |
| ·猪TTR启动子的克隆及功能分析 | 第43-44页 |
| ·转染细胞双荧光素酶活性的检测 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 肌肉和肝脏特异性表达外源基因载体的构建 | 第47-82页 |
| 1 前言 | 第47-48页 |
| 2 试验材料 | 第48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·试验试剂与试剂盒 | 第48页 |
| ·主要溶液配方 | 第48页 |
| ·菌种和质粒 | 第48页 |
| 3 试验方法 | 第48-70页 |
| ·中间载体pMyoDEGFP-N1的构建与鉴定 | 第48-52页 |
| ·肌肉特异性表达载体pSV40-myf6-MyoDEGFP-N1的构建与鉴定 | 第52-57页 |
| ·中间载体pGL-BGLhis-control的构建与鉴定 | 第57-60页 |
| ·肝脏特异性表达载体pTTRs-BGLhis-control的构建与鉴定 | 第60-65页 |
| ·细胞的培养 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR检测外源基因的转录 | 第66-70页 |
| 4 结果与分析 | 第70-79页 |
| ·中间载体pMyoDEGFP-N1的构建与鉴定 | 第70-71页 |
| ·肌肉特异性表达载体pSV40-myf6-MyoDEGFP-N1的构建与鉴定 | 第71-73页 |
| ·中间载体pBGLhis-control的构建与鉴定 | 第73-75页 |
| ·肝脏特异性表达载体pTTRs-BGLhis-control的构建与鉴定 | 第75-77页 |
| ·pSV40-myf6-MyoDEGFP-N1载体转染C2C12 mRNA水平的检测 | 第77-78页 |
| ·pTTRs-BGLhis-control载体转染Hepal-6 mRNA水平检测 | 第78-79页 |
| 5 讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 肌肉特异表达外源基因转基因小鼠的制备与鉴定 | 第82-91页 |
| 1 前言 | 第82页 |
| 2 试验材料 | 第82页 |
| ·主要仪器设备 | 第82页 |
| ·试验试剂与试剂盒 | 第82页 |
| ·试验动物 | 第82页 |
| 3 试验方法 | 第82-86页 |
| ·显微注射用DNA片段的制备及纯化 | 第83-84页 |
| ·转基因小鼠的鉴定 | 第84-86页 |
| 4 试验结果 | 第86-89页 |
| ·显微注射用DNA片段的制备及纯化 | 第86-87页 |
| ·阳性转基因小鼠的获得 | 第87-88页 |
| ·转基因小鼠PCR检测 | 第88-89页 |
| 5 讨论 | 第89-91页 |
| 第五章 结论 | 第91-93页 |
| 1 本研究获得的结果 | 第91-92页 |
| 2 下一步的研究内容 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-100页 |
| 附录1：pSV40-myf6-MyoDEGFP-N1载体的序列 | 第100-103页 |
| 附录2：pTTRs-BGLhis-control载体的序列 | 第103-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
