镁离子螯合酶D亚基互作蛋白P43功能研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-28页 |
| ·四吡咯的合成代谢 | 第8-10页 |
| ·叶绿素合成分支途径的研究 | 第10-12页 |
| ·镁离子螯合酶的克隆与表达分析 | 第12-13页 |
| ·镁离子螯合酶催化机制的研究 | 第13-17页 |
| ·镁离子螯合酶各亚基生物学功能研究 | 第17-20页 |
| ·镁离子螯合酶相互作用蛋白的研究 | 第20-21页 |
| ·P43蛋白的研究概述 | 第21-26页 |
| ·DNA复制辅助蛋白 | 第21-22页 |
| ·P43蛋白的研究现状 | 第22-26页 |
| ·研究问题的由来 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验菌株 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·RNA提取与总蛋白提取 | 第28-29页 |
| ·RNA的抽提 | 第28-29页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第29页 |
| ·豌豆叶绿体可溶蛋白的提取 | 第29-30页 |
| ·蛋白的原核表达 | 第30-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第30页 |
| ·转化与诱导表达 | 第30页 |
| ·His标签蛋白纯化 | 第30-31页 |
| ·GST-pull down | 第31-32页 |
| ·免疫共沉淀 | 第32页 |
| ·双分子荧光互补 | 第32-33页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第33-35页 |
| ·AD、BD载体的构建 | 第34页 |
| ·酵母转化 | 第34-35页 |
| ·病毒诱导的基因沉默技术 | 第35-37页 |
| ·VIGS载体的构建 | 第36-37页 |
| ·VIGS侵染实验 | 第37页 |
| ·酵母文库的筛选 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·豌豆CHLD与P43相互作用的研究 | 第39-45页 |
| ·利用酵母双杂交系统研究CHLD与P43互作 | 第39-40页 |
| ·免疫共沉淀 | 第40-42页 |
| ·GST-Pull down分析 | 第42-43页 |
| ·双分子荧光互补分析 | 第43-45页 |
| ·植物叶片中P43蛋白的检测 | 第45页 |
| ·VIGS植株中P43含量的测定 | 第45-46页 |
| ·P43的VIGS分析 | 第46页 |
| ·P43蛋白RNA结合试验 | 第46-47页 |
| ·酵母双杂交文库的小量筛选 | 第47-48页 |
| 讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 个人简历 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
