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人工合成的抗蚜基因(ASGNA)在拟南芥中的表达及抗蚜性分析研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
英文缩略语表第7-10页
第1章 文献综述第10-22页
   ·植物抗虫基因工程研究进展第11-15页
     ·苏云金芽孢杆菌毒素蛋白基因(Bt基因)第11-12页
     ·蛋白酶抑制剂第12-13页
     ·植物凝集素基因第13-15页
     ·动物毒素蛋白基因第15页
   ·雪花莲凝集素(GNA)研究概况第15-17页
     ·雪花莲凝集素的结构和功能第16页
     ·雪花莲凝集素的作用机理第16-17页
     ·雪花莲凝集素的应用第17页
   ·转基因抗虫植物存在的问题第17-19页
     ·抗虫谱较窄,害虫易产生抗性第18页
     ·抗虫基因工程的安全性问题第18页
     ·转基因抗虫植物形状的变异第18-19页
   ·增强转基因植物抗虫性的策略第19-21页
     ·优化并联合使用多价基因第19-20页
     ·“高剂量或庇护所”(high dose/refuge)策略第20页
     ·采用诱导型、组织特异性的启动子提高外源抗虫基因的表达量第20-21页
   ·本课题研究的目的和意义第21-22页
第2章 材料与方法第22-40页
   ·实验材料第22-24页
     ·植物材料、载体和宿主菌第22页
     ·实验试剂第22-24页
     ·主要仪器和设备第24页
   ·实验方法第24-40页
     ·ASGNA基因的电子克隆第24-25页
     ·over-lap PCR法克隆ASGNA基因第25-28页
     ·CaMV 35S启动子驱动ASGNA植物表达载体的构建第28-30页
     ·D-7启动子驱动ASGNA植物表达载体的构建第30-33页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化第33页
     ·农杆菌介导的真空转化法转化拟南芥第33-35页
     ·转基因拟南芥的分子鉴定第35-37页
     ·转基因拟南芥的抗虫性鉴定第37-38页
     ·花粉管通道法转化棉花第38-40页
第3章 结果与分析第40-56页
   ·ASGNA基因的人工合成第40-42页
   ·载体构建第42-47页
     ·CaMV35S启动子驱动ASGNA基因表达载体的构建第42-44页
     ·D7启动子驱动ASGNA基因表达载体的构建第44-46页
     ·两个表达载体对农杆菌LBA4404的转化第46-47页
   ·转基因拟南芥的筛选及分子鉴定第47-51页
     ·转基因拟南芥的筛选第47-48页
     ·转基因拟南芥在DNA水平上的鉴定第48-49页
     ·转基因拟南芥在RNA水平上的鉴定第49-51页
   ·转基因拟南芥的抗虫性分析第51-54页
     ·转35S-ASGNA基因拟南芥对蚜虫生长的影响第51-52页
     ·转35S-ASGNA基因拟南芥对蚜虫逃逸数量的影响第52-53页
     ·转35S-ASGNA基因拟南芥对蚜虫产子率的影响第53-54页
   ·转基因棉花的筛选及分子鉴定第54-56页
第4章 讨论第56-60页
   ·over-lap PCR合成ASGNA基因第56-57页
   ·ASGNA基因的抗虫性分析第57-58页
   ·转基因棉花的培育及注意问题第58-60页
结论第60-62页
参考文献第62-74页
致谢第74-76页
攻读学位期间的研究成果第76页

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