| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·研究背景 | 第11页 |
| ·植物内源激素 | 第11-13页 |
| ·内源激素的测定 | 第13页 |
| ·赤霉素生物合成 | 第13-15页 |
| ·赤霉素生物合成酶 | 第14页 |
| ·GA20-氧化酶 | 第14-15页 |
| ·植物诱变育种 | 第15-16页 |
| ·辐射诱变育种 | 第15页 |
| ·毛竹辐射育种研究 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要使用仪器 | 第19页 |
| ·使用网站和软件 | 第19-20页 |
| ·引物 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-32页 |
| ·毛竹种子辐射处理 | 第20页 |
| ·取样 | 第20-21页 |
| ·标准品的制备 | 第21页 |
| ·色谱条件 | 第21页 |
| ·激素样品的制备 | 第21页 |
| ·毛竹总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·RNA完整性和纯度的检测 | 第22页 |
| ·毛竹cDNA第一链的合成 | 第22页 |
| ·RACE第一链cDNA的合成 | 第22-24页 |
| ·PCR反应体系和琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·PCR反应程序 | 第24页 |
| ·PCR产物回收 | 第24-25页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第25-26页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26页 |
| ·相关培养基及试剂的配制 | 第26-27页 |
| ·挑取单菌落及菌落PCR | 第27-28页 |
| ·质粒DNA的提取与纯化 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA的酶切分析 | 第29页 |
| ·序列测定与分析 | 第29页 |
| ·荧光定量PCR样品cDNA的准备 | 第29页 |
| ·荧光定量反应内参的选择 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR引物的选择 | 第30页 |
| ·实时荧光定量PCR结果的分析 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR反应条件 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·毛竹种子的辐射处理情况 | 第32页 |
| ·HPLC测定内源激素含量 | 第32-41页 |
| ·HPLC分析条件的筛选 | 第32页 |
| ·波长的选择 | 第32-33页 |
| ·标准曲线绘制 | 第33-34页 |
| ·回收率的计算 | 第34页 |
| ·内源激素的定性分析 | 第34-35页 |
| ·内源激素的定量分析 | 第35-36页 |
| ·毛竹种子萌发过程中GA_3含量的变化 | 第36页 |
| ·不同剂量~(60)Coγ射线辐射后GA_3含量变化 | 第36-39页 |
| ·毛竹种子萌发过程中IAA含量的变化 | 第39页 |
| ·不同剂量~(60)Coγ射线辐射后IAA含量变化 | 第39-41页 |
| ·毛竹GA20-Oxidase基因的克隆与序列分析 | 第41-44页 |
| ·毛竹总RNA的提取和反转录 | 第41-42页 |
| ·毛竹GA20-Oxidase基因片段的克隆 | 第42页 |
| ·毛竹GA20-Oxidase基因片段的序列分析 | 第42-44页 |
| ·5'与3'-RACE扩增产物的克隆与测序 | 第44页 |
| ·PheGA20-Oxidase基因的表达分析 | 第44-48页 |
| ·毛竹总RNA的提取和反转录 | 第44页 |
| ·实时荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线分析 | 第44-47页 |
| ·基因表达情况分析 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| ·毛竹内源激素提取方法的讨论 | 第48页 |
| ·毛竹内源激素含量的变化 | 第48-49页 |
| ·辐射对内源激素的影响 | 第49页 |
| ·辐射对基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附图 | 第58-60页 |
| 图版说明 | 第60-61页 |
| 研究生在读期间发表文章 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
