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稳定表达猪CD163的PAM细胞系的建立

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
英文缩略词表第10-12页
第一部分 文献综述第12-36页
 第一章 猪繁殖与呼吸综合征受体CD163研究进展第12-36页
  1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概述第12-14页
  2 猪繁殖与呼吸综合征病毒受体的研究进展第14-21页
   ·病毒受体概述第14页
   ·病毒侵入宿主细胞的过程第14-16页
   ·与PRRSV感染相关细胞受体研究第16-21页
  3 CD163蛋白结构第21-24页
  4 预测SRCR 5结构域中与PRRSV结合相关的结构第24-26页
  5 CD163的表达与调节第26-28页
  参考文献第28-36页
第二部分 试验研究第36-78页
 第二章 CD163基因克隆及重组真核表达载体构建与鉴定第36-52页
  摘要第36-37页
  1 材料与方法第37-46页
   ·材料第37页
   ·方法第37-46页
  2 结果第46-48页
   ·目的基因的RT-PCR扩增第46页
   ·重组质粒pMD19-T-CD163的琼脂糖凝胶电泳鉴定第46-47页
   ·CD163基因测序及分析第47页
   ·重组质粒pcDNA4.0-CD163的酶切鉴定第47-48页
   ·重组质粒pIRES-CD163的酶切鉴定第48页
  3 讨论第48-50页
  参考文献第50-51页
  ABSTRACT第51-52页
 第三章 猪CD163的PRRSV受体的功能第52-62页
  摘要第52页
  1 材料与方法第52-55页
   ·材料第52-53页
   ·方法第53-55页
  2 结果第55-59页
   ·重组真核表达质粒pIRES-CD163的大量提取及鉴定第55-56页
   ·BHK-21细胞和PK-15细胞瞬时转染重组真核表达质粒pIRES-CD163后间接免疫荧光检测第56-57页
   ·RT-PCR检测mRNA水平CD163表达第57页
   ·细胞对PRRSV增殖能力检测第57-59页
  3 讨论第59-60页
  参考文献第60-61页
  ABSTRACT第61-62页
 第四章 稳定表达CD163的PAM细胞系的建立第62-78页
  摘要第62页
  1 材料与方法第62-67页
   ·材料第62-63页
   ·方法第63-67页
  2 结果第67-74页
   ·重组真核表达质粒pcDNA4.0-CD163大提酶切鉴定第67-68页
   ·重组真核表达质粒pCDNA4.0-CD163转染PAM细胞第68-71页
   ·RT-PCR检测重组细胞株中CD163的表达第71页
   ·通过间接免疫荧光的方法对CD163在PAM细胞表面的表达进行定位第71-72页
   ·表达CD163的PAM细胞系传代稳定性的鉴定第72页
   ·稳定表达CD163的PAM细胞对病毒增殖能力检测第72-73页
   ·重组PAM细胞株接毒后细胞病变第73-74页
  3 讨论第74-76页
  参考文献第76-77页
  ABSTRACT第77-78页
全文总结第78-80页
致谢第80页

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