| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-21页 |
| ·绒山羊的繁殖特点 | 第9-10页 |
| ·影响绒山羊繁殖的因素 | 第10-11页 |
| ·遗传因素对繁殖的影响 | 第10页 |
| ·营养因素对繁殖的影响 | 第10页 |
| ·温度对繁殖的影响 | 第10-11页 |
| ·光照对繁殖的影响 | 第11页 |
| ·激素对繁殖的影响 | 第11页 |
| ·下丘脑-垂体-卵巢轴 | 第11-13页 |
| ·下丘脑的结构和功能 | 第11-12页 |
| ·垂体的结构和功能 | 第12页 |
| ·卵巢的结构和功能 | 第12-13页 |
| ·下丘脑-垂体-卵巢轴在繁殖中的作用及影响 | 第13页 |
| ·褪黑激素及对繁殖的影响 | 第13-17页 |
| ·褪黑激素的研究进展 | 第13页 |
| ·褪黑激素的发现及其结构 | 第13-14页 |
| ·褪黑激素的来源和分布 | 第14页 |
| ·褪黑激素的生物合成与代谢 | 第14页 |
| ·褪黑激素的生物合成 | 第14页 |
| ·褪黑激素的代谢 | 第14页 |
| ·褪黑激素的分泌特点 | 第14-15页 |
| ·褪黑激素的生理功能 | 第15-17页 |
| ·褪黑激素对免疫功能的作用 | 第15页 |
| ·褪黑激素的抗氧化作用 | 第15页 |
| ·褪黑激素对消化系统的影响 | 第15-16页 |
| ·褪黑激素的抗肿瘤作用 | 第16页 |
| ·褪黑激素对动物绒毛生长的影响 | 第16页 |
| ·褪黑激素对繁殖的影响 | 第16-17页 |
| ·褪黑激素受体 | 第17-20页 |
| ·褪黑激素的受体的发现 | 第17-18页 |
| ·褪黑激素受体 1a 的结构和功能 | 第18页 |
| ·褪黑激素受体 1a 基因的分布与表达研究 | 第18-19页 |
| ·褪黑激素受体对繁殖的影响 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验动物及组织 | 第21页 |
| ·主要药品和仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| 3 实验方法 | 第23-33页 |
| ·内蒙古绒山羊下丘脑、垂体及卵巢组织总 RNA 提取 | 第23-24页 |
| ·总 RNA 的纯化 | 第24页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第24-25页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第25页 |
| ·基因片段克隆 | 第25-28页 |
| ·RT-PCR 产物凝胶回收 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·重组质粒筛选与鉴定 | 第26-27页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第26-27页 |
| ·快速提取质粒筛选 | 第27页 |
| ·菌落 PCR 快速鉴定 | 第27页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第27-28页 |
| ·重组质粒 DNA 的提取 | 第28页 |
| ·重组质粒的测序 | 第28页 |
| ·原位杂交实验仪器与溶液的预处理 | 第28-29页 |
| ·烧杯的预处理 | 第28页 |
| ·用于原位杂交溶液的制备 | 第28-29页 |
| ·原位杂交组织切片的制备 | 第29页 |
| ·载玻片的预处理 | 第29页 |
| ·载玻片的酸洗 | 第29页 |
| ·用多聚赖氨酸处理载玻片 | 第29页 |
| ·盖玻片的处理 | 第29页 |
| ·探针制备 | 第29-32页 |
| ·质粒 DNA 提取 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第30-32页 |
| ·转录探针 | 第31页 |
| ·DIG-DNA 产量测定 | 第31-32页 |
| ·原位杂交 | 第32-33页 |
| ·组织切片的制备 | 第32页 |
| ·组织切片的预处理 | 第32页 |
| ·预杂交及杂交 | 第32页 |
| ·杂交后洗涤 | 第32-33页 |
| ·显色 | 第33页 |
| 4 实验结果与分析 | 第33-39页 |
| ·内蒙古绒山羊下丘脑、垂体及卵巢组织 RNA 提取结果 | 第33-34页 |
| ·内蒙古绒山羊下丘脑、垂体及卵巢组织总 RNAmRNA 纯化结果 | 第34页 |
| ·RT-PCR 扩增结果 | 第34页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·内蒙古绒山羊 MTNR1a 基因片段克隆的测序结果 | 第35-36页 |
| ·MTNR1a 基因片段核苷酸序列分析 | 第35页 |
| ·绒山羊与其他物种 MTNR1a 基因部分核苷酸序列的比较 | 第35-36页 |
| ·MTNR1a 基因部分氨基酸序列的比较分析 | 第36页 |
| ·原位杂交结果 | 第36-39页 |
| ·MNTR1a cRNA 探针模板获得 | 第36-37页 |
| ·探针转录结果 | 第37-38页 |
| ·MTNR1a 在下丘脑、垂体及卵巢组织中原位杂交结果 | 第38-39页 |
| 5 讨论 | 第39-41页 |
| ·关于 MTNR1a 基因部分序列的分析 | 第39-40页 |
| ·关于影响原位杂交效果的因素 | 第40页 |
| ·MTNR1a 基因在哺乳动物中的表达 | 第40-41页 |
| 6 小结 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
