| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-20页 |
| ·林可霉素的简介 | 第13-14页 |
| ·林可霉素生物合成研究进展 | 第14-16页 |
| ·林可霉素生物合成抗性基因 | 第16-17页 |
| ·抗生素产生菌的自我保护机制 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| ·研究意义 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20-21页 |
| ·引物 | 第21-23页 |
| ·培养基和化学试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·大肠杆菌的培养和保存 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取 | 第25页 |
| ·DNA片段的扩增PCR | 第25-26页 |
| ·DNA片段的回收(Omega公司试剂盒) | 第26页 |
| ·DNA的酶切与连接体系 | 第26-27页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第27页 |
| ·大肠杆菌化学转化(氯化钙法)感受态的制备和转化 | 第27-28页 |
| ·高压电穿孔法感受态制备和转化 | 第28页 |
| ·林可链霉菌的培养和保存 | 第28页 |
| ·链霉菌总DNA的小量快速提取 | 第28-29页 |
| ·两亲本介导的质粒DNA在大肠杆菌与林可链霉菌之间的跨属接合转移 | 第29页 |
| ·链霉菌基因敲除突变株构建 | 第29-31页 |
| ·细胞破碎法提取林可链霉菌总RNA | 第31-33页 |
| ·林可链霉菌的发酵培养及发酵液处理 | 第33页 |
| ·高效液相色谱法检测发酵产物 | 第33页 |
| ·HPLC法测定林可霉素标准曲线 | 第33-34页 |
| ·林可链霉菌对林可霉素的抗性测定 | 第34-35页 |
| 第3章 MFS转运蛋白基因lmrA的功能分析 | 第35-44页 |
| ·引言 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-43页 |
| ·lmrA缺失突变株XJJ4及其回补菌株XJJ5的构建 | 第36-39页 |
| ·lmrA过表达突变株XJJ6的构建 | 第39-41页 |
| ·LC-G,XJJ2,XJJ4,XJJ6耐受林可霉素水平的比较 | 第41-42页 |
| ·LC-G,XJJ2,XJJ4,XJJ6中林可霉素生物合成基因转录水平的变化 | 第42-43页 |
| ·小结与讨论 | 第43-44页 |
| 第4章 ABC转运蛋白基因lmrC的功能分析 | 第44-51页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·lmrC缺失突变株XJJ7及其回补菌株XJJ8的构建 | 第44-46页 |
| ·lmrC过表达突变株XJJ9的构建 | 第46-48页 |
| ·LC-G,XJJ2,XJJ7,XJJ9耐受林可霉素水平的比较 | 第48-49页 |
| ·LC-G,XJJ2,XJJ7,XJJ9中林可霉素生物合成基因转录水平的变化 | 第49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-51页 |
| 第5章 rRNA甲基转移酶基因lmrB的初步研究 | 第51-55页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-54页 |
| ·NRRL2936中lmrB缺失突变株XJJ13的构建 | 第52-53页 |
| ·LC-G中野生型lmrB过表达突变株XJJ11的构建 | 第53-54页 |
| ·小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第6章 总结 | 第55-57页 |
| ·获得的主要成果 | 第55页 |
| ·创新之处 | 第55页 |
| ·下一部研究内容 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 硕士期间发表论文 | 第62页 |
