| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 1 引言 | 第16-37页 |
| ·家畜的繁殖力 | 第16-17页 |
| ·绵羊卵泡发育与排卵及其调控 | 第17-25页 |
| ·卵巢的形态结构和卵泡发育 | 第17-20页 |
| ·绵羊的发情和排卵 | 第20-22页 |
| ·生殖激素在卵泡发育和排卵中的调控作用 | 第22-25页 |
| ·miRNAs 在雌性生殖中的调控作用 | 第25-28页 |
| ·miRNAs 的发现 | 第25-26页 |
| ·miRNAs 的生物合成 | 第26页 |
| ·miRNAs 的作用机制 | 第26-27页 |
| ·miRNAs 在雌性生殖中的作用 | 第27-28页 |
| ·本研究主要技术简介 | 第28-34页 |
| ·电化学发光免疫分析（ECLIA）技术 | 第28-30页 |
| ·基因芯片（gene chip）技术 | 第30-32页 |
| ·实时荧光定量 PCR（Real time qPCR）技术 | 第32-34页 |
| ·本研究的目的意义和主要研究内容 | 第34-37页 |
| 2 研究一巴美肉羊发情期血清中 4 种生殖激素变化规律与产羔数关系研究 | 第37-48页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第37-38页 |
| ·主要仪器和设备 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·实验动物的同期发情处理 | 第38页 |
| ·发情鉴定 | 第38页 |
| ·血样的采集 | 第38页 |
| ·血清的制备 | 第38-39页 |
| ·排卵数确定及实验样本选择 | 第39页 |
| ·血清生殖激素浓度的测定 | 第39-40页 |
| ·数据统计分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-44页 |
| ·同期发情结果 | 第40页 |
| ·排卵情况和实验样本确定 | 第40页 |
| ·FSH 分泌变化 | 第40-41页 |
| ·LH 分泌变化 | 第41-42页 |
| ·E2分泌变化 | 第42页 |
| ·P4分泌变化 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·关于实验设计 | 第44页 |
| ·巴美肉羊血清生殖激素变化规律 | 第44-45页 |
| ·生殖激素与绵羊繁殖力的相关 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 3 研究二巴美肉羊卵巢组织 miRNA 表达谱分析及差异表达 miRNA 筛选 | 第48-67页 |
| ·实验材料 | 第48-50页 |
| ·实验动物和样品采集 | 第48页 |
| ·主要仪器和设备 | 第48-49页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第49-50页 |
| ·miRNA 芯片 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·total RNA 提取 | 第50-51页 |
| ·RNA 质检 | 第51页 |
| ·mirVana miRNA Isolation Kit 纯化 RNA | 第51-52页 |
| ·加 Poly（A）尾 | 第52页 |
| ·生物素标记 miRNA | 第52页 |
| ·芯片杂交 | 第52-53页 |
| ·芯片清洗、染色 | 第53-54页 |
| ·芯片扫描 | 第54页 |
| ·数据的提取及分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-65页 |
| ·绵羊卵巢组织总 RNA 质检 | 第54-55页 |
| ·芯片杂交信号扫描结果 | 第55-57页 |
| ·巴美肉羊卵巢组织 miRNA 表达谱 | 第57-63页 |
| ·单、双羔羊卵巢组织差异表达 miRNAs 筛选结果 | 第63页 |
| ·聚类分析结果 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·芯片在 miRNAs 表达研究中的应用 | 第65页 |
| ·绵羊卵巢组织 miRNAs 表达特征 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 4 研究三差异表达 miRNAs 的基因组定位及靶基因的预测和功能分析 | 第67-76页 |
| ·实验数据和相关生物学软件 | 第67页 |
| ·实验数据 | 第67页 |
| ·相关数据库及生物学软件 | 第67页 |
| ·数据分析方法 | 第67-68页 |
| ·差异表达 miRNAs 及其前体位置分析 | 第67页 |
| ·差异表达 miRNAs 的靶基因预测和筛选 | 第67-68页 |
| ·部分差异表达 miRNAs 靶基因的 GO 功能分类分析 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-71页 |
| ·绵羊卵巢组织差异表达 miRNAs 及其前体位置分析结果 | 第68页 |
| ·绵羊卵巢组织差异表达 miRNAs 靶基因预测结果 | 第68-69页 |
| ·靶基因的 GO 注释结果 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第71-75页 |
| ·差异表达 miRNAs 的基因组定位和靶基因预测筛选 | 第71-72页 |
| ·miR-376b-5p 部分靶基因在卵巢功能和卵泡发育过程中的作用 | 第72-74页 |
| ·miR-1185-5p 部分靶基因在卵巢功能和卵泡发育过程中的作用 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 5 研究四 miRNA Real Time RT-PCR 验证 miRNA 芯片结果准确性 | 第76-87页 |
| ·实验材料 | 第76-77页 |
| ·实验动物和样品采集 | 第76页 |
| ·主要仪器和设备 | 第76页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第76-77页 |
| ·miRNA Real Time RT-PCR 实验原理 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-80页 |
| ·引物设计 | 第77页 |
| ·total RNA 提取和质检 | 第77页 |
| ·total RNA 过柱纯化 | 第77-78页 |
| ·total RNA 逆转录反应 | 第78-79页 |
| ·定量 PCR 反应 | 第79页 |
| ·miRNA Real Time RT-PCR 产物 1.5%非变性琼脂糖凝胶电泳检测扩增特异性 | 第79-80页 |
| ·数据分析 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-86页 |
| ·卵巢组织总 RNA 抽提结果 | 第80页 |
| ·内参基因 5s rRNA 的 Real time RT-PCR 结果 | 第80-82页 |
| ·待测基因 oar-miR-1185-5p 的 Real Time RT-PCR 结果 | 第82-84页 |
| ·待测基因 oar-miR-381-5p 基因的 Real time RT-PCR 结果 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| ·小结 | 第87页 |
| 6 结论 | 第87-88页 |
| 7 本论文创新点和展望 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-105页 |
| 附录 | 第105-120页 |
| 作者简介 | 第120页 |
| 博士期间发表论文 | 第120页 |
