| 前言 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-23页 |
| 第1章 引言 | 第23-25页 |
| 第2章 文献综述 | 第25-47页 |
| ·除草剂阿特拉津的使用现状 | 第25-26页 |
| ·ATR 健康威胁的流行病学研究 | 第26-27页 |
| ·ATR 的生物学毒性研究进展 | 第27-42页 |
| ·ATR 的神经系统毒性 | 第27-29页 |
| ·ATR 的免疫系统毒性 | 第29-33页 |
| ·ATR 的生殖系统毒性 | 第33-36页 |
| ·ATR 的内分泌系统毒性 | 第36-39页 |
| ·ATR 导致氧化应激损伤 | 第39-40页 |
| ·ATR 的遗传系统毒性 | 第40-42页 |
| ·卵巢癌的发病现状及研究进展 | 第42-47页 |
| ·卵巢癌的发病现状 | 第42-43页 |
| ·ATR 对卵巢癌的影响的研究进展 | 第43-47页 |
| 第3章 研究内容 | 第47-67页 |
| ·材料 | 第47-52页 |
| ·实验用细胞 | 第47页 |
| ·主要仪器与设备 | 第47-48页 |
| ·主要试剂 | 第48-50页 |
| ·阿特拉津(ATR)及细胞培养相关试剂 | 第48-49页 |
| ·Western-blot 相关试剂 | 第49页 |
| ·RT-PCR 相关试剂 | 第49页 |
| ·其他相关试剂 | 第49-50页 |
| ·主要试剂的配制方法 | 第50-52页 |
| ·IMDM 培养液 | 第50页 |
| ·MTT(5mg/ml)溶液 | 第50页 |
| ·PBS 缓冲液(0.1M,PH7.4) | 第50页 |
| ·1M DTT(20ml) | 第50页 |
| ·溴化乙啶(EB, 10mg/ml) | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE 电泳缓冲液(5×Tris-Glycine Buffer, 1L) | 第51页 |
| ·TBST Buffer(Western 杂交膜清洗液)(1L) | 第51页 |
| ·10% SDS (pH7.2, 100ml) | 第51页 |
| ·30% Acr/Bic | 第51页 |
| ·SDS-PAGE 浓缩胶缓冲液 (1.0mol/L Tris-Hcl, pH6.8, 1L) | 第51页 |
| ·SDS-PAGE 分离胶缓冲液 (1.5mol/L Tris-Hcl, pH8.8, 1L) | 第51页 |
| ·Western 杂交用膜转移缓冲液(1L) | 第51-52页 |
| ·10%(M/V)过硫酸铵(10ml) | 第52页 |
| ·5×SDS-PAGE Loading Buffer(5ml) | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-65页 |
| ·细胞培养 | 第52-54页 |
| ·细胞换液 | 第52-53页 |
| ·细胞传代 | 第53页 |
| ·细胞冻存 | 第53-54页 |
| ·细胞复苏 | 第54页 |
| ·MTT 法检测 ATR 对 Skov3 细胞增殖能力的影响 | 第54-55页 |
| ·克隆形成实验检测 ATR 对 Skov3 细胞克隆形成能力的影响 | 第55-56页 |
| ·预处理细胞 | 第55页 |
| ·接种细胞 | 第55-56页 |
| ·继续孵育 | 第56页 |
| ·镜下计数 | 第56页 |
| ·划痕实验评价细胞迁移能力 | 第56-57页 |
| ·预处理细胞 | 第56-57页 |
| ·划痕后继续培养 | 第57页 |
| ·Trans well 实验评价细胞侵袭转移能力 | 第57-59页 |
| ·预处理细胞 | 第57页 |
| ·制备单细胞悬液 | 第57页 |
| ·水化 ECM 膜 | 第57-58页 |
| ·上室接种细胞并形成血清浓度梯度后培养 | 第58页 |
| ·瑞氏-姬姆萨复合染色 | 第58页 |
| ·MTT 检测下室穿过细胞外基质 atrixTM膜的细胞 | 第58-59页 |
| ·Real time PCR 检测增殖相关基因 P53、P21 的转录 | 第59-61页 |
| ·预处理细胞 | 第59页 |
| ·mRNA 提取 | 第59页 |
| ·总 RNA 逆转录 | 第59-60页 |
| ·real time PCR 检测 P21、p53 的转录 | 第60-61页 |
| ·流式细胞术检测 ATR 暴露下 Skov3 细胞周期变化 | 第61页 |
| ·western blot 检测 ATR 暴露对 Skov3 细胞蛋白表达的影响 | 第61-64页 |
| ·样本总蛋白的提取及定量 | 第61页 |
| ·样本总蛋白的提取 | 第61-62页 |
| ·蛋白定量 | 第62页 |
| ·Western Blot 检测蛋白的表达量 | 第62-64页 |
| ·免疫组化染色方法检测增殖相关基因 PCNA 的表达 | 第64-65页 |
| ·数据统计 | 第65-67页 |
| 第4章 实验结果 | 第67-75页 |
| ·ATR 暴露对 SKOV3 细胞增殖能力的影响 | 第67-69页 |
| ·ATR 暴露后 Skov3 细胞的增殖能力增强 | 第67页 |
| ·ATR 暴露促进 Skov3 细胞的克隆形成 | 第67-68页 |
| ·ATR 暴露后 Skov3 细胞 PCNA 的表达变化上调 | 第68-69页 |
| ·ATR 暴露后 Skov3 细胞周期的变化及机制 | 第69-71页 |
| ·ATR 促进 Skov3 细胞周期进程 | 第69页 |
| ·ATR 暴露后 Skov3 细胞 P53、P21 基因的转录水平下调 | 第69-70页 |
| ·ATR 暴露下调 Skov3 细胞 P53、P21 的表达、上调 CyclinE 的表达 | 第70-71页 |
| ·ATR 对 Skov3 细胞侵袭能力的影响 | 第71-73页 |
| ·ATR 增加 Skov3 细胞的侵袭能力 | 第71-72页 |
| ·ATR 促进 Skov3 细胞的迁移能力 | 第72页 |
| ·ATR 促进卵巢癌 SKOV3 细胞 MMP2、MMP9 表达上调 | 第72-73页 |
| ·ATR 暴露对 VEGF、SURVIVIN 等促癌基因的影响 | 第73-75页 |
| 第5章 讨论 | 第75-84页 |
| 第6章 结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100页 |