基于单抗技术的三聚氰胺ELISA检测方法的建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 插图和附表清单 | 第10-11页 |
| 本论文常用缩写词 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 三聚氰胺免疫检测的研究意义 | 第13-19页 |
| ·三聚氰胺的理化性质和用途 | 第13-15页 |
| ·三聚氰胺的危害 | 第15-17页 |
| ·三聚氰胺的检测方法 | 第17-19页 |
| 2 三聚氰胺免疫检测技术的基本原理 | 第19-24页 |
| ·抗体技术的发展 | 第19-20页 |
| ·抗原 -抗体的结合反应 | 第20-21页 |
| ·抗原与小分子免疫 | 第21页 |
| ·三聚氰胺免疫检测原理 | 第21-22页 |
| ·免疫分析技术的发展 | 第22-24页 |
| 引言 | 第24-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·细胞系 | 第26页 |
| ·主要试剂与器材 | 第26页 |
| ·主要溶液配制 | 第26-29页 |
| ·抗原鉴定溶液配制 | 第26-27页 |
| ·细胞融合与培养常用试剂 | 第27-28页 |
| ·ELISA 实验试剂 | 第28页 |
| ·抗体纯化试剂 | 第28-29页 |
| ·抗体浓度检测试剂 | 第29页 |
| ·制备酶标记抗原试剂 | 第29页 |
| ·三聚氰胺标准溶液 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第31页 |
| ·单抗的部分免疫学特性鉴定 | 第31-32页 |
| ·单克的纯化 | 第32-33页 |
| ·间接竞争 ELISA 方法的建立和优化 | 第33页 |
| ·酶标抗原的制备 | 第33-34页 |
| ·酶标抗原的活性鉴定 | 第34页 |
| ·直接竞争 ELISA 方法的建立 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·人工抗原鉴定 | 第35-36页 |
| ·UV 鉴定 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第35-36页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第36页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第36页 |
| ·部分单抗生物学特性鉴定 | 第36-38页 |
| ·单抗的 EL IS A 效价 | 第36-37页 |
| ·单抗亚型鉴定 | 第37页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第37页 |
| ·C4 单抗分子量测定 | 第37-38页 |
| ·C4 单抗亲和力测定 | 第38页 |
| ·间接竞争 ELISA 方法的建立和优化 | 第38-42页 |
| ·抗原抗体最适工作浓度的选择 | 第38页 |
| ·包被条件的确定 | 第38-39页 |
| ·封闭液的选择 | 第39页 |
| ·封闭时间的确定 | 第39-40页 |
| ·酶标二抗作用浓度的选择 | 第40页 |
| ·酶标二抗作用时间的选择 | 第40-41页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第41页 |
| ·间接竞争 ELISA 方法的建立 | 第41-42页 |
| ·标准曲线 | 第42页 |
| ·酶标抗原的鉴定 | 第42-43页 |
| ·直接竞争 ELISA 方法的建立 | 第43-45页 |
| ·抗原抗体最适工作浓度的选择 | 第43页 |
| ·直接竞争 ELISA 方法的建立 | 第43页 |
| ·标准曲线 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-51页 |
| ·抗原 | 第45-46页 |
| ·杂交瘤细胞融合及培养 | 第46-47页 |
| ·IgM 抗体的纯化 | 第47页 |
| ·三聚氰胺单克隆抗体与载体蛋白的交叉反应 | 第47-48页 |
| ·酶标抗原的制备 | 第48页 |
| ·ELISA 实验的影响因素 | 第48-49页 |
| ·直接和间接竞争 ELISA 法的比较 | 第49-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第51页 |
| ·三聚氰胺单克隆抗体的制备和鉴定 | 第51页 |
| ·三聚氰胺单克隆抗体的纯化 | 第51页 |
| ·三聚氰胺间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第51页 |
| ·酶标抗原的制备和直接竞争ELISA方法的建立 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
