Prestin基因相关人耳聋疾病动物模型的建立
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-24页 |
| 1 听觉传导的电动机制相关研究 | 第12-15页 |
| ·听觉传导的电动机制研究现状 | 第12-14页 |
| ·Prestin研究的重要性 | 第14-15页 |
| 2 基因打靶早期的研究 | 第15-23页 |
| ·不同的基因打靶技术 | 第17-21页 |
| ·完全基因敲除 | 第17-18页 |
| ·条件基因敲除 | 第18-20页 |
| ·基因敲入 | 第20-21页 |
| ·基因打靶系统 | 第21-23页 |
| ·基因打靶基本方式 | 第21页 |
| ·基因修饰细胞的选择系统 | 第21-23页 |
| 3 研究思路及意义 | 第23-24页 |
| 实验设计和实验方法 | 第24-44页 |
| ·实验总体设计 | 第24-27页 |
| ·基因打靶的策略 | 第24页 |
| ·载体的设计原则 | 第24页 |
| ·载体的设计方案 | 第24-27页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第27-30页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-44页 |
| ·Prestin基因敲除载体的构建 | 第30-36页 |
| ·胚胎干细胞培养及打靶细胞筛选 | 第36-39页 |
| ·显微注射获取嵌合体小鼠 | 第39-44页 |
| 实验结果 | 第44-48页 |
| ·Prestin敲入载体构建结果 | 第44-46页 |
| ·PL253+A+B重组质粒验证结果 | 第44页 |
| ·EL350细胞中同源重组后验证结果 | 第44-45页 |
| ·重叠PCR扩增点突变片段 | 第45页 |
| ·突变外显子置换野生型外显子同时引入筛选标记 | 第45-46页 |
| ·显微操作相关结果 | 第46-47页 |
| ·不同供体胚胎获得的嵌合体小鼠 | 第47-48页 |
| 三 讨论 | 第48-53页 |
| ·基因敲入载体的构建 | 第48-49页 |
| ·Prestin的特性 | 第49-50页 |
| ·Prestin蛋白在声音信号传导过程中的作用 | 第50-51页 |
| ·不同来源供体胚胎的嵌合性 | 第51-52页 |
| ·Prestin在其他模式生物中的表达 | 第52页 |
| ·Prestin基因敲入小鼠模型应用展望 | 第52-53页 |
| 四 结论 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 学术论文评阅及答辩情况表 | 第65页 |
