中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
文献综述 | 第10-21页 |
1 植物病毒基因组概述 | 第10-16页 |
·单链DNA病毒基因组 | 第10-11页 |
·双生病毒科 | 第10页 |
·矮缩病毒科 | 第10-11页 |
·双链DNA病毒基因组 | 第11-12页 |
·花椰菜花叶病毒属 | 第11页 |
·杆状DNA病毒属 | 第11-12页 |
·东格鲁病毒属 | 第12页 |
·正义单链RNA病毒基因组 | 第12-14页 |
·雀麦花叶病毒属 | 第12页 |
·马铃薯Y病毒科 | 第12-13页 |
·烟草脆裂病毒属 | 第13页 |
·芜菁黄化花叶病毒属 | 第13-14页 |
·马铃薯X病毒属 | 第14页 |
·烟草花叶病毒属 | 第14页 |
·负义单链RNA病毒基因组 | 第14-16页 |
·弹状病毒科 | 第15页 |
·尼布亚病毒科 | 第15页 |
·纤细病毒属 | 第15-16页 |
·双链RNA病毒基因组 | 第16页 |
·呼肠病毒科 | 第16页 |
·双分病毒科 | 第16页 |
2 花椰菜花叶病毒属基因组研究进展 | 第16-21页 |
·花椰菜花叶病毒全基因组序列测序 | 第17页 |
·花椰菜花叶病毒属病毒各ORF的研究 | 第17-18页 |
·花椰菜花叶病毒基因组研究成果的应用概况 | 第18-21页 |
·花椰菜花叶病毒属病毒的侵染性克隆 | 第18-19页 |
·CAMV病毒载体 | 第19页 |
·CAMV 35S启动子 | 第19-21页 |
引言 | 第21-22页 |
材料与方法 | 第22-30页 |
1 供试材料 | 第22页 |
·病样来源 | 第22页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌种和载体 | 第22页 |
·酶和化学试剂 | 第22页 |
·常用缓冲溶液和培养基 | 第22页 |
·抗生素 | 第22页 |
·仪器设备 | 第22页 |
2 试验方法 | 第22-30页 |
·叶片总DNA的提取 | 第22-23页 |
·PCR技术 | 第23页 |
·PCR产物的克隆 | 第23-25页 |
·PCR产物回收和纯化 | 第23-24页 |
·PCR产物的连接 | 第24页 |
·感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
·连接产物的转化 | 第25页 |
·阳性克隆的PCR鉴定 | 第25页 |
·质粒提取 | 第25页 |
·克隆基因的测序、分析和登录 | 第25-26页 |
·克隆SVBV全基因组序列 | 第26页 |
·SVBV全基因组序列克隆引物设计 | 第26页 |
·PCR扩增SVBV全基因组序列 | 第26页 |
·SVBV全基因组序列分析与克隆 | 第26-28页 |
·确定各SVBV中国分离物各个ORF序列位置 | 第26页 |
·SVBV中国分离物各个ORF序列相似性分析 | 第26-27页 |
·SVBV中国分离物各个ORF序列克隆引物的设计 | 第27-28页 |
·SVBV中国分离物各个ORF序列的PCR扩增 | 第28页 |
·植物表达载体的构建 | 第28页 |
·植物表达载体的构建策略 | 第28页 |
·植物表达载体的构建方法 | 第28页 |
·液氮冻融法转化根癌土壤杆菌 | 第28-29页 |
·花苞浸泡法转化拟南芥 | 第29页 |
·转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第29-30页 |
结果与分析 | 第30-39页 |
1 SVBV全基因组序列的测定 | 第30页 |
2 SVBV全基因组序列的序列分析与克隆 | 第30-35页 |
·SVBV中国分离物全基因组序列与同属病毒全基因组序列相似性分析 | 第30-31页 |
·SVBV中国分离物各ORF位置的确定 | 第31-32页 |
·SVBV中国分离物各ORF序列与同属其他病毒对应ORF序列相似性分析 | 第32-35页 |
·SVBV各ORF序列的PCR扩增与克隆 | 第35页 |
3 SVBV中国分离物 ORF VI 植物表达载体的构建 | 第35-37页 |
4 拟南芥的转化和卡那抗性植株的获得 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
1 SVBV全基因组序列的测定与分析 | 第39页 |
2 SVBV中国分离物各ORF的克隆 | 第39-40页 |
3 SVBV中国分离物ORF VI植物表达载体的构建与拟南芥转化 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
附录A:常用缓冲液及培养基配方法 | 第49-52页 |
附录B:常用的抗生素和激素及使用浓度 | 第52-53页 |
附录C:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第53-55页 |
附录D:本文所用的重要缩写词及中文对照 | 第55-56页 |
附录E:草莓镶脉病毒中国分离物全基因组序列 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |