| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写词 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| ·抗虫基因的种类及特点 | 第11-16页 |
| ·Bt毒蛋白基因 | 第12-13页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第13-14页 |
| ·植物外源凝集素基因 | 第14页 |
| ·淀粉酶抑制剂基因 | 第14-15页 |
| ·动物来源的抗虫基因 | 第15页 |
| ·其它抗虫基因 | 第15页 |
| ·抗虫基因存在的主要问题及解决策略 | 第15-16页 |
| ·水稻基因工程育种的技术体系 | 第16-20页 |
| ·构建嵌合基因 | 第16-17页 |
| ·选择转化载体 | 第17页 |
| ·选择转化受体 | 第17-18页 |
| ·转化方法 | 第18-19页 |
| ·转化体的筛选和转基因植株的分子鉴定 | 第19-20页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化的研究 | 第20-23页 |
| ·农杆菌菌株与质粒载体 | 第20页 |
| ·农杆菌Vir区基因活性的诱导 | 第20-21页 |
| ·培养基成分 | 第21页 |
| ·愈伤组织的预处理 | 第21页 |
| ·农杆菌悬浮侵染环境 | 第21-22页 |
| ·共培养环境和时间 | 第22页 |
| ·共培养后农杆菌的抑制 | 第22页 |
| ·筛选标记基因以及筛选剂的选择 | 第22-23页 |
| ·转抗虫基因水稻 | 第23-24页 |
| ·转Bt基因水稻 | 第23-24页 |
| ·其它抗虫基因水稻 | 第24页 |
| ·转抗虫基因水稻安全性研究 | 第24-26页 |
| ·转抗虫基因水稻的食品安全性问题 | 第25页 |
| ·转抗虫基因水稻的生态安全性问题 | 第25-26页 |
| ·本研究的立题依据与日的意义 | 第26页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·供试水稻品种 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·化学试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·载体的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的农杆菌转化 | 第29-30页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第30页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第30-31页 |
| ·转基因植株再生 | 第31页 |
| ·结果统计方法 | 第31-32页 |
| ·水稻叶片DNA提取 | 第32页 |
| ·水稻转基因再生植株潮霉素抗性检测 | 第32页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第32-34页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第34-46页 |
| ·新型Bt基因含选择标记农杆菌转化载体的构建与鉴定 | 第34-39页 |
| ·含新型Bt基因中间载体pUPROK-Cry30Fa1与pUPROK-Cry54Aa1的构建与鉴定 | 第34-36页 |
| ·含新型Bt基因双元载体pCDMAR-Cry30Fa1-Hyg与pCDMAR-Cry54Aa1-Hyg的构建与鉴定 | 第36-39页 |
| ·籼性水稻成熟胚愈伤组织的获得 | 第39-40页 |
| ·抗坏血酸对籼性水稻成熟胚愈伤组织获得的影响研究 | 第39-40页 |
| ·继代次数对籼性水稻成熟胚愈伤组织获得的影响 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的转新型Bt基因籼性水稻的获得 | 第40-43页 |
| ·筛选压对愈伤组织转化率的影响 | 第41-42页 |
| ·干燥处理对愈伤组织分化的影响 | 第42-43页 |
| ·转基因抗性植株T_0代的检测 | 第43-46页 |
| ·转基因抗性植株T_0代离体叶片的潮霉素检测 | 第43-44页 |
| ·转基因再生植株T_0代的PCR检测 | 第44-46页 |
| 4. 讨论与结论 | 第46-50页 |
| ·新型杀虫基因Cry30Fa1与Cry54Aa1的实际应用性 | 第46页 |
| ·籼稻愈伤组织的培养与转化体系的优化 | 第46-48页 |
| ·组织培养过程中的褐化问题 | 第46-47页 |
| ·愈伤组织继代次数对转化率的影响 | 第47页 |
| ·干燥处理对抗性愈伤组织分化的影响 | 第47-48页 |
| ·筛选压对抗性愈伤组织获得的影响 | 第48页 |
| ·双T-DNA共转化获得去除标记基因的转基因植株 | 第48-49页 |
| ·用离体叶片检测转基因水稻对潮霉素抗性的可行性 | 第49-50页 |
| 5. 后续研究设想 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-64页 |
