摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
·大豆概况 | 第11-13页 |
·膨胀素 | 第13-17页 |
·膨胀素的发现 | 第13页 |
·膨胀素的结构及其基因家族 | 第13-14页 |
·膨胀素的调节机制 | 第14-15页 |
·膨胀素的功能分析 | 第15-16页 |
·矮化植物的研究进展 | 第16-17页 |
·基因克隆 | 第17-19页 |
·基因克隆技术 | 第17页 |
·RACE技术 | 第17-18页 |
·蛋白质三维结构的预测方法 | 第18-19页 |
·基因重组菌的发酵罐发酵 | 第19-20页 |
·研究目的和意义 | 第20页 |
·技术路线 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-32页 |
·材料 | 第22-24页 |
·供试材料 | 第22页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·生物学试剂及常规化学试剂 | 第22页 |
·缓冲液及主要试剂的配制 | 第22-23页 |
·细菌培养基 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·方法 | 第24-32页 |
·矮化大豆HK808膨胀素(expansin)基因的克隆 | 第24-28页 |
·矮化大豆expansin基因的生物信息学研究 | 第28页 |
·大肠杆菌表达载体的构建 | 第28-29页 |
·重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第29-31页 |
·发酵罐的发酵验证 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-49页 |
·RNA提取及检测 | 第32页 |
·中间片段的克隆 | 第32-34页 |
·expansin基因的获得 | 第32-33页 |
·测序分析 | 第33-34页 |
·5’RACE克隆 | 第34-35页 |
·3’RACE克隆 | 第35页 |
·全长基因拼接 | 第35-37页 |
·矮化大豆expansin基因的生物信息学研究 | 第37-42页 |
·矮化大豆与正常大豆氨expansin酸序列的比较 | 第37-38页 |
·矮化大豆expansin与正常大豆expansin的二级结构比较 | 第38-39页 |
·矮化大豆expansin与正常大豆expansin的三级结构预测及比较 | 第39-40页 |
·正常大豆expansin与drugbank数据库的药物结合模拟 | 第40页 |
·10种化合物与正常大豆expansin的结合方式 | 第40-42页 |
·目的基因在大肠杆菌(DE3)中的表达 | 第42-45页 |
·目的基因的获得 | 第42页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第42-45页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第45页 |
·发酵罐发酵研究 | 第45-49页 |
·高效表达菌株的筛选 | 第45-46页 |
·发酵罐发酵实验 | 第46-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
·矮化大豆膨胀素基因的分析 | 第49页 |
·矮化大豆膨胀素基因在原核生物大肠杆菌中的表达 | 第49-50页 |
·蛋白预测分析 | 第50-51页 |
·药物筛选 | 第51-52页 |
·发酵罐的应用 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第60页 |