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矮化大豆GmEXPA41基因的克隆及功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-22页
   ·大豆概况第11-13页
   ·膨胀素第13-17页
     ·膨胀素的发现第13页
     ·膨胀素的结构及其基因家族第13-14页
     ·膨胀素的调节机制第14-15页
     ·膨胀素的功能分析第15-16页
     ·矮化植物的研究进展第16-17页
   ·基因克隆第17-19页
     ·基因克隆技术第17页
     ·RACE技术第17-18页
     ·蛋白质三维结构的预测方法第18-19页
   ·基因重组菌的发酵罐发酵第19-20页
   ·研究目的和意义第20页
   ·技术路线第20-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·材料第22-24页
     ·供试材料第22页
     ·菌株与质粒第22页
     ·生物学试剂及常规化学试剂第22页
     ·缓冲液及主要试剂的配制第22-23页
     ·细菌培养基第23-24页
     ·主要仪器第24页
   ·方法第24-32页
     ·矮化大豆HK808膨胀素(expansin)基因的克隆第24-28页
     ·矮化大豆expansin基因的生物信息学研究第28页
     ·大肠杆菌表达载体的构建第28-29页
     ·重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达第29-31页
     ·发酵罐的发酵验证第31-32页
3 结果与分析第32-49页
   ·RNA提取及检测第32页
   ·中间片段的克隆第32-34页
     ·expansin基因的获得第32-33页
     ·测序分析第33-34页
   ·5’RACE克隆第34-35页
   ·3’RACE克隆第35页
   ·全长基因拼接第35-37页
   ·矮化大豆expansin基因的生物信息学研究第37-42页
     ·矮化大豆与正常大豆氨expansin酸序列的比较第37-38页
     ·矮化大豆expansin与正常大豆expansin的二级结构比较第38-39页
     ·矮化大豆expansin与正常大豆expansin的三级结构预测及比较第39-40页
     ·正常大豆expansin与drugbank数据库的药物结合模拟第40页
     ·10种化合物与正常大豆expansin的结合方式第40-42页
   ·目的基因在大肠杆菌(DE3)中的表达第42-45页
     ·目的基因的获得第42页
     ·表达载体的构建及鉴定第42-45页
     ·目的基因在大肠杆菌中的表达第45页
   ·发酵罐发酵研究第45-49页
     ·高效表达菌株的筛选第45-46页
     ·发酵罐发酵实验第46-49页
4 讨论第49-53页
   ·矮化大豆膨胀素基因的分析第49页
   ·矮化大豆膨胀素基因在原核生物大肠杆菌中的表达第49-50页
   ·蛋白预测分析第50-51页
   ·药物筛选第51-52页
   ·发酵罐的应用第52-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-60页
攻读学位期间发表的学术论文第60页

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