摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-28页 |
·蓝藻及研究背景 | 第10-14页 |
·蓝细菌与鱼腥藻PCC7120 | 第10-11页 |
·蓝藻的基因工程应用 | 第11-13页 |
·野生蓝藻生态危害 | 第13-14页 |
·蓝藻的光合作用机制 | 第14-18页 |
·藻胆蛋白与藻胆体 | 第14-15页 |
·藻胆色素(phycobilin) | 第15-16页 |
·藻胆体(phycobilisome,PBS) | 第16-17页 |
·藻胆蛋白(phycobiliprotein,PBP) | 第17-18页 |
·蓝藻中天冬酰胺甲基转移酶基因cpcM | 第18-20页 |
·鱼腥藻PCC7120 的分子及遗传学操作 | 第20-27页 |
·蓝藻质粒与载体构建 | 第20-21页 |
·蓝藻外源基因转化 | 第21-26页 |
·鱼腥藻突变株的筛选 | 第26-27页 |
·本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
第2章 鱼腥藻 Anabaena PCC7120 基因 all0012 的生 物信息学分析 | 第28-34页 |
·分析软件与方法 | 第28页 |
·all0012 基因的分析结果 | 第28-33页 |
·小结与讨论 | 第33-34页 |
第3章 突变体构建的材料与设计 | 第34-38页 |
·本实验所用菌株与质粒 | 第34页 |
·所用试剂与培养基配方 | 第34-37页 |
·主要分子生物学试剂 | 第34页 |
·培养基 | 第34-36页 |
·其他溶液 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36-37页 |
·实验设计 | 第37-38页 |
第4章 鱼腥藻(Anabaena PCC7120)all0012 相关基 因的克隆载体的构建 | 第38-47页 |
·鱼腥藻PCC7120 藻总DNA 的提取 | 第38-39页 |
·CTAB 法提取藻总DNA | 第38页 |
·石英砂法提取藻总DNA | 第38-39页 |
·CTAB 石英砂结合及超声破碎法 | 第39页 |
·载体质粒DNA 的提取及其基因操作 | 第39-41页 |
·裂解法提取质粒 | 第39-40页 |
·DNA 片段的回收与质粒的酶切处理 | 第40页 |
·质粒的去磷酸化 | 第40-41页 |
·PCR 扩增与克隆质粒载体的构建 | 第41-45页 |
·DNA 片段的PCR 扩增 | 第41-43页 |
·转化大肠杆菌 | 第43-44页 |
·PCR 鉴定 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-45页 |
·小结与讨论 | 第45-47页 |
第5章 鱼腥藻 PCC7120(Anabaena PCC7120)all0012 缺失体的构建 | 第47-54页 |
·缺失体的体外克隆 | 第47-50页 |
·抗性基因的获得与连接 | 第48-49页 |
·L-str/sp-R片段与整合载体的连接 | 第49-50页 |
·鱼腥藻PCC7120 对壮观霉素的基础抗性检测 | 第50页 |
·通过三亲本杂交法对鱼腥藻PCC7120 进行基因转移及筛选 | 第50-51页 |
·鱼腥藻 all0012 基因缺失的光敏性检测 | 第51-52页 |
·小结与讨论 | 第52-54页 |
第6章 鱼腥藻 PCC7120 All0012 蛋白的表达检测 | 第54-60页 |
·All0012 蛋白的表达 | 第54页 |
·材料与方法 | 第54-56页 |
·载体与菌株 | 第54页 |
·主要分子生物学试剂 | 第54-55页 |
·主要仪器设备 | 第55-56页 |
·实验流程与方法 | 第56-58页 |
·all0012 基因重组质粒表达载体的构建 | 第56页 |
·IPTG 诱导的蛋白表达 | 第56页 |
·诱导蛋白SDS-PAGE 检测样品的制备 | 第56页 |
·SDS-PAGE 检测诱导蛋白 | 第56-58页 |
·结果与分析 | 第58页 |
·pET-all0012 的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第58页 |
·重组蛋白的SDS-PAGE 电泳检测 | 第58页 |
·小结与讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第73页 |