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鱼腥藻PCC7120 all0012基因的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第1章 绪论第10-28页
   ·蓝藻及研究背景第10-14页
     ·蓝细菌与鱼腥藻PCC7120第10-11页
     ·蓝藻的基因工程应用第11-13页
     ·野生蓝藻生态危害第13-14页
   ·蓝藻的光合作用机制第14-18页
     ·藻胆蛋白与藻胆体第14-15页
     ·藻胆色素(phycobilin)第15-16页
     ·藻胆体(phycobilisome,PBS)第16-17页
     ·藻胆蛋白(phycobiliprotein,PBP)第17-18页
   ·蓝藻中天冬酰胺甲基转移酶基因cpcM第18-20页
   ·鱼腥藻PCC7120 的分子及遗传学操作第20-27页
     ·蓝藻质粒与载体构建第20-21页
     ·蓝藻外源基因转化第21-26页
     ·鱼腥藻突变株的筛选第26-27页
   ·本研究的目的与意义第27-28页
第2章 鱼腥藻 Anabaena PCC7120 基因 all0012 的生 物信息学分析第28-34页
   ·分析软件与方法第28页
   ·all0012 基因的分析结果第28-33页
   ·小结与讨论第33-34页
第3章 突变体构建的材料与设计第34-38页
   ·本实验所用菌株与质粒第34页
   ·所用试剂与培养基配方第34-37页
     ·主要分子生物学试剂第34页
     ·培养基第34-36页
     ·其他溶液第36页
     ·主要仪器第36-37页
   ·实验设计第37-38页
第4章 鱼腥藻(Anabaena PCC7120)all0012 相关基 因的克隆载体的构建第38-47页
   ·鱼腥藻PCC7120 藻总DNA 的提取第38-39页
     ·CTAB 法提取藻总DNA第38页
     ·石英砂法提取藻总DNA第38-39页
     ·CTAB 石英砂结合及超声破碎法第39页
   ·载体质粒DNA 的提取及其基因操作第39-41页
     ·裂解法提取质粒第39-40页
     ·DNA 片段的回收与质粒的酶切处理第40页
     ·质粒的去磷酸化第40-41页
   ·PCR 扩增与克隆质粒载体的构建第41-45页
     ·DNA 片段的PCR 扩增第41-43页
     ·转化大肠杆菌第43-44页
     ·PCR 鉴定第44页
     ·结果与分析第44-45页
   ·小结与讨论第45-47页
第5章 鱼腥藻 PCC7120(Anabaena PCC7120)all0012 缺失体的构建第47-54页
   ·缺失体的体外克隆第47-50页
     ·抗性基因的获得与连接第48-49页
     ·L-str/sp-R片段与整合载体的连接第49-50页
   ·鱼腥藻PCC7120 对壮观霉素的基础抗性检测第50页
   ·通过三亲本杂交法对鱼腥藻PCC7120 进行基因转移及筛选第50-51页
   ·鱼腥藻 all0012 基因缺失的光敏性检测第51-52页
   ·小结与讨论第52-54页
第6章 鱼腥藻 PCC7120 All0012 蛋白的表达检测第54-60页
   ·All0012 蛋白的表达第54页
   ·材料与方法第54-56页
     ·载体与菌株第54页
     ·主要分子生物学试剂第54-55页
     ·主要仪器设备第55-56页
   ·实验流程与方法第56-58页
     ·all0012 基因重组质粒表达载体的构建第56页
     ·IPTG 诱导的蛋白表达第56页
     ·诱导蛋白SDS-PAGE 检测样品的制备第56页
     ·SDS-PAGE 检测诱导蛋白第56-58页
   ·结果与分析第58页
     ·pET-all0012 的琼脂糖凝胶电泳检测第58页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE 电泳检测第58页
   ·小结与讨论第58-60页
结论第60-62页
参考文献第62-72页
致谢第72-73页
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文第73页

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