| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第15-34页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| ·骨桥蛋白的来源及纯化 | 第17-19页 |
| ·骨桥蛋白的来源 | 第17页 |
| ·骨桥蛋白基因的性状 | 第17页 |
| ·骨桥蛋白在机体中的分布 | 第17-18页 |
| ·骨桥蛋白表达调控 | 第18页 |
| ·骨桥蛋白的纯化 | 第18-19页 |
| ·蛋白层析方法及凝胶选择概述 | 第19-23页 |
| ·层析技术的原理 | 第19页 |
| ·层析一般目标及方法 | 第19-20页 |
| ·层析技术的分类 | 第20-21页 |
| ·层析凝胶选择 | 第21-23页 |
| ·骨桥蛋白结构与功能研究 | 第23-27页 |
| ·一级结构—氨基酸序列比较 | 第23-24页 |
| ·二级结构预测及结构模型 | 第24-25页 |
| ·翻译后修饰 | 第25页 |
| ·结构—功能分析 | 第25-27页 |
| ·蛋白结构研究方法 | 第27-33页 |
| ·二级结构预测方法简介 | 第27-29页 |
| ·三级结构预测方法 | 第29-30页 |
| ·二级结构测定方法简介 | 第30-32页 |
| ·三级结构测定方法 | 第32-33页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第33页 |
| ·课题创新点 | 第33-34页 |
| 2 材料 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| 3 方法 | 第36-45页 |
| ·牛乳骨桥蛋白纯化工艺优化 | 第36-37页 |
| ·牛乳前处理及DEAE-Sephacel 阴离子交换层析 | 第36页 |
| ·去除酪蛋白实验 | 第36页 |
| ·Phenyl–Sepharose 疏水作用层析 | 第36-37页 |
| ·SOURCE 5RPC ST 反相作用层析 | 第37页 |
| ·牛乳骨桥蛋白的再鉴定 | 第37-39页 |
| ·制胶和制样 | 第37-38页 |
| ·电泳 | 第38-39页 |
| ·检测 | 第39页 |
| ·蛋白含量测定 | 第39-40页 |
| ·各洗脱峰蛋白含量测定 | 第39页 |
| ·各步层析洗脱峰骨桥蛋白含量检测 | 第39-40页 |
| ·骨桥蛋白抑制晶体生长活性的扫描电镜实验 | 第40-42页 |
| ·石英基片亲水性处理 | 第40页 |
| ·晶体生长抑制实验 | 第40-41页 |
| ·对比实验 | 第41页 |
| ·扫描电镜观察 | 第41-42页 |
| ·骨桥蛋白抑制晶体生长活性的原子吸收实验 | 第42-44页 |
| ·标准曲线及回收率实验 | 第42-43页 |
| ·各洗脱峰组分对草酸钙晶体生长抑制活性的原子吸收实验 | 第43-44页 |
| ·不同浓度骨桥蛋白抑制草酸钙晶体生长的原子吸收实验 | 第44页 |
| ·骨桥蛋白二级结构的傅里叶红外光谱测定 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第44页 |
| ·图谱处理 | 第44-45页 |
| 4 结果与分析 | 第45-66页 |
| ·牛乳骨桥蛋白纯化优化 | 第45-48页 |
| ·DEAE-Sephacel 阴离子交换层析 | 第45页 |
| ·Phenyl–Sepharose 疏水作用层析 | 第45-47页 |
| ·SOURCE 5RPC ST 反相作用层析 | 第47-48页 |
| ·不同色谱层析各个洗脱峰骨桥蛋白的SDS-PAGE 结果 | 第48-51页 |
| ·各层析步骤中蛋白含量测定结果 | 第51-53页 |
| ·各洗脱峰蛋白含量测定 | 第51-52页 |
| ·各洗脱峰骨桥蛋白含量测定标准曲线绘制 | 第52页 |
| ·各步层析洗脱峰骨桥蛋白含量检测 | 第52页 |
| ·各纯化步骤所得骨桥蛋白及最终纯度计算 | 第52-53页 |
| ·各层析步骤洗脱峰对草酸钙晶体生长影响的扫描电镜实验 | 第53-62页 |
| ·DEAE–Sephacel 色谱层析各梯度洗脱组分对晶体生长抑制作用的扫描电镜实验 | 第55-59页 |
| ·Phenyl–Sepharose 6FF 疏水作用层析洗脱各组分对晶体生长的抑制作用 | 第59-61页 |
| ·SOURCE 5RPC ST 反相作用层析各洗脱组分对晶体生长抑制作用的扫描电镜实验 | 第61-62页 |
| ·骨桥蛋白抑制晶体生长活性的原子吸收实验 | 第62-63页 |
| ·骨桥蛋白二级结构的傅里叶红外光谱测定 | 第63-66页 |
| 5 讨论 | 第66-71页 |
| ·牛乳骨桥蛋白纯化优化 | 第66-67页 |
| ·牛乳骨桥蛋白的再鉴定 | 第67-68页 |
| ·牛乳骨桥蛋白二级结构测定 | 第68-71页 |
| 6 结论 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |
