| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-39页 |
| ·Intein与蛋白质剪接简介 | 第13-15页 |
| ·Intein的相关术语 | 第15页 |
| ·Intein的分布与基因迁移 | 第15-17页 |
| ·Intein的保守基序 | 第17-18页 |
| ·Intein的类型 | 第18-19页 |
| ·Intein的剪接机理 | 第19-23页 |
| ·丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸蛋白酶作用机理 | 第19页 |
| ·蛋白质剪接中间体 | 第19-20页 |
| ·蛋白质剪接机理 | 第20-23页 |
| ·Intein的三维结构 | 第23-24页 |
| ·Intein的应用 | 第24-32页 |
| ·蛋白质纯化 | 第24-27页 |
| ·蛋白质部分标记 | 第27-29页 |
| ·Intein介导的蛋白质连接 | 第29-30页 |
| ·环化肽的制备 | 第30-31页 |
| ·分子开关与蛋白质芯片 | 第31页 |
| ·药物靶点 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-39页 |
| 第二章 结核分支杆菌RecA mini-intein溶液结构和性质 | 第39-85页 |
| ·引言 | 第39-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第42-61页 |
| ·蛋白质表达与纯化 | 第42-44页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第44页 |
| ·蛋白质分子量测定 | 第44-45页 |
| ·蛋白质稳定性 | 第45页 |
| ·解析核磁共振谱图和数据处理 | 第45-55页 |
| ·结构计算 | 第55-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-75页 |
| ·化学位移认证 | 第61-63页 |
| ·组氨酸异构化 | 第63-64页 |
| ·溶液结构计算和结构描述 | 第64-68页 |
| ·组合化学位移干扰 | 第68-71页 |
| ·氢氘交换 | 第71-74页 |
| ·N端断裂活性 | 第74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 第三章 集胞藻PCC6803 DnaE split intein溶液性质与相互作用 | 第85-129页 |
| ·引言 | 第85-91页 |
| ·内在无序蛋白质 | 第85-87页 |
| ·集胞藻PCC6803 DnaE split intein | 第87-91页 |
| ·实验材料与方法 | 第91-113页 |
| ·DnaE-N123质粒构建 | 第91-98页 |
| ·DnaE-N123前体蛋白质表达与纯化 | 第98-99页 |
| ·TEV蛋白酶消化DnaE-N123前体蛋白质 | 第99页 |
| ·DnaE-N123纯化 | 第99-101页 |
| ·DnaE-N123分子量鉴定 | 第101-102页 |
| ·~(15)N-标记样品制备 | 第102页 |
| ·DnaE-C36质粒构建 | 第102-103页 |
| ·DnaE-C36表达与纯化 | 第103-105页 |
| ·DnaE-N123与DnaE-C36共表达质粒构建 | 第105-106页 |
| ·DnaE-N123-C36复合蛋白质表达与纯化 | 第106页 |
| ·实验方法 | 第106-113页 |
| ·结果与讨论 | 第113-124页 |
| ·蛋白质与肽纯化 | 第113-115页 |
| ·稳定性 | 第115页 |
| ·圆二色谱 | 第115-117页 |
| ·荧光谱 | 第117页 |
| ·生物信息学分析 | 第117-118页 |
| ·动态光散射 | 第118-119页 |
| ·共表达促进蛋白质折叠 | 第119-120页 |
| ·核磁共振谱 | 第120-122页 |
| ·表面等离子体共振 | 第122-123页 |
| ·小结 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-129页 |
| 第四章 Mtu RecA intein为靶点的抗结核药物研究 | 第129-149页 |
| ·引言 | 第129-137页 |
| ·结核发病机理 | 第129-131页 |
| ·治疗结核 | 第131-133页 |
| ·疫苗、药物和靶点 | 第133-136页 |
| ·Mtu RecA intein研究的意义 | 第136-137页 |
| ·实验材料与方法 | 第137-139页 |
| ·实验材料 | 第137-138页 |
| ·实验方法 | 第138-139页 |
| ·结果与讨论 | 第139-143页 |
| ·体外筛选体系 | 第139-140页 |
| ·大肠杆菌体内筛选体系 | 第140页 |
| ·结核菌检测 | 第140-141页 |
| ·抑制机理 | 第141-142页 |
| ·小结 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-149页 |
| 附录1 在读期间构建的质粒 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第152页 |
