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棉花细胞质雄性不育系线粒体基因组细菌人工染色体文库的构建及其鉴定

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-25页
   ·高等植物细胞质雄性不育在分子水平上的研究进展第7-17页
     ·细胞核不育与细胞质雄性不育第7-8页
     ·植物线粒体与 CMS 的关系第8-13页
     ·叶绿体 DNA 及其产物与 CMS第13-14页
     ·与细胞质雄性不育有关的线粒体基因的研究第14-16页
     ·与细胞质雄性不育有关的特异多肽第16页
     ·基因工程创造 CMS第16-17页
   ·棉花细胞质雄性不育在杂种优势中的利用第17-18页
   ·细菌人工染色体 BAC 文库的研究进展第18-24页
     ·人工染色体载体研究进展第19-21页
     ·人工染色体文库的比较研究第21-23页
     ·BAC 文库在基因组学研究中的应用第23-24页
   ·立题意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-46页
   ·试验材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株第25页
     ·载体第25-26页
     ·试剂第26页
     ·仪器第26页
     ·PCR 引物第26-27页
   ·方法第27-46页
     ·高分子量线粒体 DNA 的制备第27-32页
     ·载体制备第32-37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第37-38页
     ·文库的构建第38-42页
     ·BAC 文库的评价第42-44页
     ·棉花 P30A 线粒体 DNA BAC 混合池的构建及阳性克隆筛选第44-46页
第三章 结果与分析第46-62页
   ·线粒体及线粒体 DNA 的提取与制备第46-50页
     ·黄化苗的获得第46页
     ·线粒体的提取第46-47页
     ·FDA 荧光染色检测第47-48页
     ·mtDNA 的提取第48页
     ·mtDNA 的酶切电泳分析第48-49页
     ·紫外分光光度计检测mtDNA 的纯度第49页
     ·mtDNA 的 PCR 检测第49-50页
   ·BAC 载体 DNA 的制备第50-54页
     ·碱裂解法大提载体 PCC1BAC 质粒第50-51页
     ·载体的纯化及 LambdaDNA 定量第51-52页
     ·闭环载体 DNA 的酶切第52页
     ·载体脱磷效果检测第52-54页
   ·感受态细胞 DH108 的制备以及转化效率的检测第54-55页
   ·文库的构建第55-62页
     ·mtDNA 的部分酶切第55-56页
     ·大量酶切后 DNA 片段的选择第56-57页
     ·mtDNA 酶切片段的分离第57-58页
     ·连接与转化第58-59页
     ·BAC 文库评价第59-61页
     ·BAC 混和池的构建及筛选第61-62页
第四章 讨论第62-66页
   ·高质量、高分子量棉花mtDNA 的提取第62-63页
   ·BAC载体的选择及载体DNA的制备第63-64页
   ·载体 DNA 的制备第64页
   ·BAC 文库的构建第64-65页
   ·混合池的筛选第65-66页
第五章 结论第66页
第六章 创新点第66-67页
参考文献第67-72页
附录:主要试剂配方第72-76页
致谢第76-77页
作者简介第77页

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