一 中文摘要 | 第1-8页 |
二 ABSTRACT | 第8-10页 |
三 研究背景 | 第10-14页 |
四 论文正文 大蒜素和金银花抗VSV诱导的细胞凋亡作用及其机制研究 | 第14-49页 |
(一) 实验材料 | 第14-17页 |
1.实验细胞株 | 第14页 |
2.实验药物 | 第14页 |
3.病毒 | 第14页 |
4.实验试剂 | 第14-17页 |
5.实验仪器和设备 | 第17页 |
(二) 实验方法 | 第17-25页 |
1.细胞的复苏、培养和冻存 | 第17-19页 |
2.MT-2、THP-1和WISH细胞的药物分组培养 | 第19页 |
3.药物和病毒作用后细胞形态学的观察 | 第19页 |
4.噻唑蓝(MTT)比色法 | 第19-21页 |
原理 | 第19-20页 |
实验步骤 | 第20-21页 |
(1) 大蒜素和金银花安全实验浓度的确定 | 第20页 |
(2) 大蒜素抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞存活率的检测 | 第20-21页 |
(3) 金银花抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞存活率的检测 | 第21页 |
5.流式细胞仪检测细胞凋亡—Annexin V/PI双染法 | 第21-22页 |
原理 | 第21页 |
实验步骤 | 第21-22页 |
(1) 大蒜素抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞凋亡率的检测 | 第21-22页 |
(2) 金银花抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞凋亡率的检测 | 第22页 |
6.Western Blot检测Caspase3、6、7、9和NF-κB | 第22-25页 |
原理 | 第22页 |
主要试剂及其配制 | 第22-24页 |
实验步骤 | 第24-25页 |
(1) 大蒜素抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞各组Caspase-3,6,7,9和NF-κB蛋白表达的检测 | 第24-25页 |
(2) 金银花抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞各组Caspase-3,6,7,9和NF-κB蛋白表达的检测 | 第25页 |
7.统计学处理 | 第25页 |
(三) 实验结果 | 第25-38页 |
1.用药物和病毒作用后细胞的形态学观察 | 第25页 |
2.大蒜素和金银花的毒性剂量及安全实验浓度 | 第25-26页 |
3.不同浓度的大蒜素和金银花能增加VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞的存活率 | 第26页 |
4.不同浓度的大蒜素和金银花能减少VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞的凋亡率 | 第26-27页 |
5.不同浓度的大蒜素和金银花可以抑制VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞中Caspase-3,6,7,9和NF-κB蛋白的表达 | 第27-38页 |
(四) 分析与讨论 | 第38-43页 |
1.VSV与细胞凋亡 | 第38页 |
2.细胞凋亡与药物干预 | 第38-39页 |
(1) 大蒜素抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞凋亡的作用 | 第38-39页 |
(2) 金银花抗VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞凋亡的作用 | 第39页 |
3.药物抑制细胞凋亡的信号传导机制 | 第39-43页 |
(1) 细胞凋亡的Caspase信号传导通路 | 第39-40页 |
(2) 细胞凋亡的NF-κB信号调控机制 | 第40-41页 |
(3) 大蒜素和金银花抑制VSV诱导的THP-1、MT-2和WISH细胞凋亡的信号传导机制 | 第41-43页 |
(五) 结论 | 第43-44页 |
(六) 小结 | 第44-45页 |
(七) 参考文献 | 第45-49页 |
五 论文综述 | 第49-63页 |
六 致谢 | 第63页 |