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甜菜叶绿体高效表达载体的构建

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 绪论第12-20页
   ·课题背景第12页
   ·课题的来源及研究的目的和意义第12页
   ·国内外在该方向的研究现状及分析第12-18页
     ·植物基因工程研究进展第12-13页
     ·植物叶绿体基因工程研究进展第13-14页
     ·植物基因工程筛选标记研究进展第14-15页
     ·绿体表达载体与植物叶绿体基因组结构叶研究进展第15-17页
     ·植物叶绿体基因的表达与调控第17-18页
     ·甜菜核基因工程研究进展第18页
   ·主要研究内容第18-20页
     ·甜菜叶绿体同源重组片段rps7 与部分rps12/ndhB的克隆第18-19页
     ·筛选标记基因的克隆第19页
     ·启动子与终止子第19页
     ·甜菜叶绿体高效表达载体的构建第19-20页
第2章 材料与方法第20-32页
   ·实验材料第20-22页
     ·植物材料第20页
     ·宿主菌和载体质粒第20页
     ·药品和酶第20页
     ·常用试剂第20-21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·实验方法第22-32页
     ·甜菜叶绿体DNA的提取第22-23页
     ·同源片段rps7 与部分rps12 基因的PCR扩增第23页
     ·同源片段ndhB基因的PCR扩增第23-24页
     ·筛选标记基因pmi基因的PCR扩增第24页
     ·甘蔗ppdk基因的cDNA的RT-PCR扩增引物设计第24-25页
     ·DNA片段的回收与纯化第25页
     ·感受态细胞的制备(CaC12法)第25-26页
     ·质粒DNA的大量制备第26-27页
     ·RNA的提取第27页
     ·RT-PCR步骤第27-29页
     ·连接与转化第29-30页
     ·DNA片段的去磷酸化反应第30页
     ·重组质粒的鉴定第30页
     ·RNA样品的电泳第30-32页
第3章 同源片段与筛选标记的扩增与克隆第32-42页
   ·甜菜叶绿体rps 7 与部分rps12 基因的PCR扩增与克隆第32-35页
     ·甜菜叶绿体DNA片段rps7 与部分rps12 基因的扩增第32-34页
     ·rps7 与部分rps12 基因的克隆第34页
     ·重组的质粒pTL1 的限制性酶切鉴定第34-35页
   ·甜菜叶绿体DNA片段ndhB基因的扩增与克隆第35-38页
     ·甜菜叶绿体DNA片段ndhB基因的扩增第35页
     ·ndhB基因的克隆与连接第35-37页
     ·重组的质粒pTL2 的限制性酶切鉴定第37-38页
   ·pmi基因的PCR扩增第38-39页
   ·讨论第39-41页
   ·本章小结第41-42页
第4章 高效叶绿体表达载体pTB的构建第42-50页
   ·中间载体pH1 的构建第42-44页
   ·中间载体pH2 的构建第44-45页
   ·中间载体pH3 的构建第45页
   ·甜菜叶绿体高效定点转化表达载体pTB的构建第45-48页
   ·讨论第48-49页
   ·本章小结第49-50页
第5章 甘蔗ppdk基因的RT-PCR扩增与克隆第50-54页
   ·甘蔗RNA的提取第50页
   ·RT-PCR产物电泳检测结果第50-51页
   ·ppdk基因的RT-PCR产物的克隆第51-52页
   ·讨论第52-53页
   ·本章小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-58页
附录1第58-60页
附录2第60-62页
附录3第62-63页
附录4第63-65页
攻读学位期间发表的学术论文第65-66页
哈尔滨工业大学硕士学位论文原创性声明第66页
哈尔滨工业大学硕士学位论文使用授权书第66-67页
哈尔滨工业大学硕士学位涉密论文管理第67-68页
致谢第68页

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