摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第1章 绪论 | 第12-20页 |
·课题背景 | 第12页 |
·课题的来源及研究的目的和意义 | 第12页 |
·国内外在该方向的研究现状及分析 | 第12-18页 |
·植物基因工程研究进展 | 第12-13页 |
·植物叶绿体基因工程研究进展 | 第13-14页 |
·植物基因工程筛选标记研究进展 | 第14-15页 |
·绿体表达载体与植物叶绿体基因组结构叶研究进展 | 第15-17页 |
·植物叶绿体基因的表达与调控 | 第17-18页 |
·甜菜核基因工程研究进展 | 第18页 |
·主要研究内容 | 第18-20页 |
·甜菜叶绿体同源重组片段rps7 与部分rps12/ndhB的克隆 | 第18-19页 |
·筛选标记基因的克隆 | 第19页 |
·启动子与终止子 | 第19页 |
·甜菜叶绿体高效表达载体的构建 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-32页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·植物材料 | 第20页 |
·宿主菌和载体质粒 | 第20页 |
·药品和酶 | 第20页 |
·常用试剂 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-32页 |
·甜菜叶绿体DNA的提取 | 第22-23页 |
·同源片段rps7 与部分rps12 基因的PCR扩增 | 第23页 |
·同源片段ndhB基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
·筛选标记基因pmi基因的PCR扩增 | 第24页 |
·甘蔗ppdk基因的cDNA的RT-PCR扩增引物设计 | 第24-25页 |
·DNA片段的回收与纯化 | 第25页 |
·感受态细胞的制备(CaC12法) | 第25-26页 |
·质粒DNA的大量制备 | 第26-27页 |
·RNA的提取 | 第27页 |
·RT-PCR步骤 | 第27-29页 |
·连接与转化 | 第29-30页 |
·DNA片段的去磷酸化反应 | 第30页 |
·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
·RNA样品的电泳 | 第30-32页 |
第3章 同源片段与筛选标记的扩增与克隆 | 第32-42页 |
·甜菜叶绿体rps 7 与部分rps12 基因的PCR扩增与克隆 | 第32-35页 |
·甜菜叶绿体DNA片段rps7 与部分rps12 基因的扩增 | 第32-34页 |
·rps7 与部分rps12 基因的克隆 | 第34页 |
·重组的质粒pTL1 的限制性酶切鉴定 | 第34-35页 |
·甜菜叶绿体DNA片段ndhB基因的扩增与克隆 | 第35-38页 |
·甜菜叶绿体DNA片段ndhB基因的扩增 | 第35页 |
·ndhB基因的克隆与连接 | 第35-37页 |
·重组的质粒pTL2 的限制性酶切鉴定 | 第37-38页 |
·pmi基因的PCR扩增 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第4章 高效叶绿体表达载体pTB的构建 | 第42-50页 |
·中间载体pH1 的构建 | 第42-44页 |
·中间载体pH2 的构建 | 第44-45页 |
·中间载体pH3 的构建 | 第45页 |
·甜菜叶绿体高效定点转化表达载体pTB的构建 | 第45-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·本章小结 | 第49-50页 |
第5章 甘蔗ppdk基因的RT-PCR扩增与克隆 | 第50-54页 |
·甘蔗RNA的提取 | 第50页 |
·RT-PCR产物电泳检测结果 | 第50-51页 |
·ppdk基因的RT-PCR产物的克隆 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·本章小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
附录1 | 第58-60页 |
附录2 | 第60-62页 |
附录3 | 第62-63页 |
附录4 | 第63-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
哈尔滨工业大学硕士学位论文原创性声明 | 第66页 |
哈尔滨工业大学硕士学位论文使用授权书 | 第66-67页 |
哈尔滨工业大学硕士学位涉密论文管理 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |