前言 | 第1-13页 |
中文摘要 | 第13-17页 |
第一章 哺乳类动物核移植 | 第17-75页 |
前言 | 第17-18页 |
一 核移植研究的历史概况 | 第18-26页 |
1. 哺乳类动物胚胎细胞核移植研究进展 | 第19-21页 |
2. 哺乳动物类胚胎干细胞核移植研究进展 | 第21-23页 |
3. 哺乳类动物体细胞核移植研究进展 | 第23-24页 |
4. 哺乳类异种动物克隆研究进展 | 第24-26页 |
5. 国内哺乳动物克隆研究进展 | 第26页 |
二 哺乳动物核移植方法研究进展 | 第26-32页 |
1. 核移植用仪器设备 | 第26-27页 |
2. 核移植用显微工具及其制备 | 第27页 |
(1) 去核针的拉制 | 第27页 |
(2) 注核针的拉制 | 第27页 |
(3) 固定管的制备 | 第27页 |
3. 核移植方法 | 第27-32页 |
(1) 核移植受体细胞的去核 | 第28-30页 |
(2) 核移植供体细胞的分离 | 第30-31页 |
(3) 克隆胚胎的重建 | 第31-32页 |
三 克隆胚胎激活研究进展 | 第32-38页 |
1. 物理激活 | 第33-34页 |
2. 化学激活 | 第34-38页 |
四 重建克隆胚胎早期事件 | 第38-42页 |
1. 重组胚胎核形态重塑 | 第38-40页 |
2. 重组胚胎早期分子生物学事件 | 第40-42页 |
五 影响克隆胚胎发育的因素 | 第42-50页 |
1. 核移植受体细胞对克隆胚胎发育的影响 | 第42-46页 |
(1) 受体细胞类型对核移植胚胎重建和发育的影响 | 第43-44页 |
(2) 卵母细胞来源和发育时期对核移植胚胎重建的影响 | 第44-46页 |
2. 核移植供体细胞对克隆胚胎发育的影响 | 第46-48页 |
(1) 核移植供体细胞发育时期和细胞周期对胚胎克隆的影响 | 第46-47页 |
(2) 核移植供体体细胞类型对体细胞克隆的影响 | 第47-48页 |
3. 核质相互作用 | 第48-49页 |
4. 激活方法的影响 | 第49-50页 |
六 克隆动物存在的问题 | 第50-51页 |
七 克隆哺乳动物应用前景和展望 | 第51-75页 |
1. 克隆技术在基础科学研究中的作用 | 第51页 |
2. 克隆技术在医学领域中的应用 | 第51-52页 |
3. 克隆技术在畜牧业生产中的应用 | 第52页 |
4. 克隆技术在其它方面的应用 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-75页 |
第二章 山羊卵泡卵母细胞的采集 | 第75-81页 |
1. 材料和方法 | 第76页 |
1.1 屠宰卵巢的采集 | 第76页 |
1.2 卵巢卵母细胞的采集 | 第76页 |
2. 结果 | 第76-77页 |
2.1 不同采集方法采集可用卵母细胞数 | 第76-77页 |
2.2 不同季节采集的可用卵母细胞数 | 第77页 |
3. 讨论 | 第77-78页 |
3.1 不同采集方法采集屠宰山羊卵巢的可用卵母细胞数 | 第77-78页 |
3.2 不同季节采集屠宰山羊卵巢采集的可用卵母细胞数 | 第78页 |
4. 结论 | 第78页 |
参考文献 | 第78-81页 |
第三章 山羊卵泡卵母细胞的体外成熟 | 第81-89页 |
1. 材料和方法 | 第82-83页 |
1.1 屠宰山羊卵巢的采集 | 第82页 |
1.2 屠宰山羊卵巢卵泡卵母细胞的采集 | 第82页 |
1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟 | 第82页 |
1.4 成熟检查 | 第82-83页 |
2. 结果 | 第83-85页 |
2.1 不同季节采集的屠宰山羊卵巢卵母细胞体外成熟比较 | 第83-84页 |
2.2 不同采集运输屠宰山羊卵巢的温度对卵母细胞体外成熟的影响 | 第84页 |
2.3 卵母细胞大小对卵母细胞体外成熟的影响 | 第84页 |
2.4 不同激素配比对卵母细胞体外成熟的影响 | 第84-85页 |
2.5 生长因子对卵母细胞体外成熟的影响 | 第85页 |
3. 讨论 | 第85-87页 |
3.1 不同季节采集的屠宰山羊卵巢卵母细胞体外成熟比较 | 第85-86页 |
3.2 不同温度运输屠宰山羊卵巢对卵母细胞体外成熟的影响 | 第86页 |
3.3 卵母细胞大小对卵母细胞体外成熟的影响 | 第86页 |
3.4 不同激素配比对卵母细胞体外成熟的影响 | 第86页 |
3.5 生长因子对卵母细胞体外成熟的影响 | 第86-87页 |
4. 结论 | 第87页 |
参考文献 | 第87-89页 |
第四章 山羊卵母细胞孤雌激活 | 第89-101页 |
1. 材料和方法 | 第90-91页 |
1.1 屠宰山羊卵巢的采集 | 第90页 |
1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集 | 第90页 |
1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟 | 第90页 |
1.4 成熟卵母细胞的激活 | 第90-91页 |
2. 结果 | 第91-94页 |
2.1 不同浓度的乙醇对山羊卵母细胞的激活比较 | 第91-92页 |
2.2 Sr~(2+)-CB在不同激活时间对山羊卵母细胞的激活比较 | 第92页 |
2.3 6-DMAP和6-DMAP-CB不同激活时间对山羊卵母细胞的激活 | 第92-93页 |
2.4 6-DMAP对电激活山羊卵母细胞的激活影响 | 第93-94页 |
2.5 温度对山羊卵母细胞的激活 | 第94页 |
3. 讨论 | 第94-96页 |
3.1 乙醇对山羊卵母细胞的激活 | 第94页 |
3.2 Sr~(2+)-CB对山羊卵母细胞的激活 | 第94-95页 |
3.3 6-DMAP和6-DMAP-CB对山羊卵母细胞的激活 | 第95页 |
3.4 6-DMAP对电激活山羊卵母细胞发育的影响 | 第95-96页 |
3.5 温度对山羊卵母细胞的激活 | 第96页 |
4. 结论 | 第96页 |
参考文献 | 第96-101页 |
第五章 山羊早期胚胎体外培养 | 第101-107页 |
1. 材料和方法 | 第102-103页 |
1.1 屠宰山羊卵巢的采集 | 第102页 |
1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集 | 第102页 |
1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟 | 第102页 |
1.4 成熟卵母细胞的激活 | 第102页 |
1.5 孤雌激活山羊胚胎的体外培养 | 第102-103页 |
2. 结果 | 第103-104页 |
2.1 不同培养液培养山羊孤雌激活胚胎的比较 | 第103页 |
2.2 mCR1中添加不同蛋白或氨基酸培养山羊孤雌激活胚胎的比较 | 第103-104页 |
3. 讨论 | 第104-105页 |
3.1 不同培养液体外培养山羊孤雌激活胚胎的比较 | 第104页 |
3.2 mCR1中添加不同蛋白或氨基酸培养山羊孤雌激活胚胎的比较 | 第104-105页 |
4. 结论 | 第105页 |
参考文献 | 第105-107页 |
第六章 山羊体细胞的分离和培养 | 第107-113页 |
1. 材料和方法 | 第107-108页 |
1.1 山羊颗粒细胞和卵丘细胞的采集和体外培养 | 第107-108页 |
1.2 山羊皮肤成纤维细胞的采集和体外培养 | 第108页 |
1.3 培养细胞的传代 | 第108页 |
1.4 培养细胞的冷冻保存 | 第108页 |
2. 结果 | 第108-109页 |
3. 讨论 | 第109-110页 |
4. 结论 | 第110页 |
参考文献 | 第110-113页 |
第七章 山羊成年体细胞核移植 | 第113-125页 |
1. 材料和方法 | 第114-116页 |
1.1 屠宰山羊卵巢的采集 | 第114页 |
1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集 | 第114-115页 |
1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟 | 第115页 |
1.4 成熟卵母细胞的去核 | 第115页 |
1.5 供体细胞的准备 | 第115页 |
1.6 核移植 | 第115页 |
1.7 克隆胚胎的激活 | 第115-116页 |
1.8 克隆胚胎的体外培养 | 第116页 |
1.9 克隆胚胎的外科手术移植 | 第116页 |
2. 结果 | 第116-120页 |
2.1 去注核的效率 | 第116页 |
2.2 Sr~(2+)-CB激活克隆胚胎的卵裂率和胚胎移植结果 | 第116-117页 |
2.3 I-6DMAP激活不同细胞克隆胚胎的卵裂率和发育率 | 第117页 |
2.4 颗粒细胞和皮肤成纤维细胞克隆胚胎的移植结果 | 第117-120页 |
3. 讨论 | 第120-121页 |
3.1 不同激活方法对体细胞核移植胚胎发育的影响 | 第120-121页 |
3.2 不同类型供体体细胞核移植对其进一步发育能力的影响 | 第121页 |
3.3 体细胞核移植胚胎的移植结果 | 第121页 |
4. 结论 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-125页 |
第八章 山羊核移植胚胎早期形态 | 第125-133页 |
1. 材料和方法 | 第125-126页 |
1.1 山羊体细胞克隆胚胎的生产 | 第125-126页 |
1.2 山羊体细胞克隆胚胎的固定和染色 | 第126页 |
1.3 山羊孤雌激活胚胎的固定和染色 | 第126页 |
2. 结果 | 第126-129页 |
3. 讨论 | 第129-130页 |
4. 结论 | 第130页 |
参考文献 | 第130-133页 |
第九章 体细胞克隆山羊微卫星DNA分析 | 第133-136页 |
1. 材料和方法 | 第133-135页 |
1.1 微卫星DNA引物合成 | 第133-134页 |
1.2 山羊不同个体总DNA的提取 | 第134页 |
1.3 不同个体DNA的微卫星DNA PCR | 第134-135页 |
1.4 微卫星DNA PCR产物的聚丙烯酰胺测序胶电泳 | 第135页 |
1.5 微卫星DNA PCR产物电泳板染色 | 第135页 |
2. 结果 | 第135-136页 |
3. 讨论 | 第136页 |
4. 结论 | 第136页 |
参考文献 | 第136-139页 |
Abstract | 第139-143页 |
作者简介 | 第143页 |