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成年体细胞克隆山羊研究

前言第1-13页
中文摘要第13-17页
第一章 哺乳类动物核移植第17-75页
 前言第17-18页
 一 核移植研究的历史概况第18-26页
  1. 哺乳类动物胚胎细胞核移植研究进展第19-21页
  2. 哺乳动物类胚胎干细胞核移植研究进展第21-23页
  3. 哺乳类动物体细胞核移植研究进展第23-24页
  4. 哺乳类异种动物克隆研究进展第24-26页
  5. 国内哺乳动物克隆研究进展第26页
 二 哺乳动物核移植方法研究进展第26-32页
  1. 核移植用仪器设备第26-27页
  2. 核移植用显微工具及其制备第27页
   (1) 去核针的拉制第27页
   (2) 注核针的拉制第27页
   (3) 固定管的制备第27页
  3. 核移植方法第27-32页
   (1) 核移植受体细胞的去核第28-30页
   (2) 核移植供体细胞的分离第30-31页
   (3) 克隆胚胎的重建第31-32页
 三 克隆胚胎激活研究进展第32-38页
  1. 物理激活第33-34页
  2. 化学激活第34-38页
 四 重建克隆胚胎早期事件第38-42页
  1. 重组胚胎核形态重塑第38-40页
  2. 重组胚胎早期分子生物学事件第40-42页
 五 影响克隆胚胎发育的因素第42-50页
  1. 核移植受体细胞对克隆胚胎发育的影响第42-46页
   (1) 受体细胞类型对核移植胚胎重建和发育的影响第43-44页
   (2) 卵母细胞来源和发育时期对核移植胚胎重建的影响第44-46页
  2. 核移植供体细胞对克隆胚胎发育的影响第46-48页
   (1) 核移植供体细胞发育时期和细胞周期对胚胎克隆的影响第46-47页
   (2) 核移植供体体细胞类型对体细胞克隆的影响第47-48页
  3. 核质相互作用第48-49页
  4. 激活方法的影响第49-50页
 六 克隆动物存在的问题第50-51页
 七 克隆哺乳动物应用前景和展望第51-75页
  1. 克隆技术在基础科学研究中的作用第51页
  2. 克隆技术在医学领域中的应用第51-52页
  3. 克隆技术在畜牧业生产中的应用第52页
  4. 克隆技术在其它方面的应用第52-53页
  参考文献第53-75页
第二章 山羊卵泡卵母细胞的采集第75-81页
 1. 材料和方法第76页
  1.1 屠宰卵巢的采集第76页
  1.2 卵巢卵母细胞的采集第76页
 2. 结果第76-77页
  2.1 不同采集方法采集可用卵母细胞数第76-77页
  2.2 不同季节采集的可用卵母细胞数第77页
 3. 讨论第77-78页
  3.1 不同采集方法采集屠宰山羊卵巢的可用卵母细胞数第77-78页
  3.2 不同季节采集屠宰山羊卵巢采集的可用卵母细胞数第78页
 4. 结论第78页
 参考文献第78-81页
第三章 山羊卵泡卵母细胞的体外成熟第81-89页
 1. 材料和方法第82-83页
  1.1 屠宰山羊卵巢的采集第82页
  1.2 屠宰山羊卵巢卵泡卵母细胞的采集第82页
  1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟第82页
  1.4 成熟检查第82-83页
 2. 结果第83-85页
  2.1 不同季节采集的屠宰山羊卵巢卵母细胞体外成熟比较第83-84页
  2.2 不同采集运输屠宰山羊卵巢的温度对卵母细胞体外成熟的影响第84页
  2.3 卵母细胞大小对卵母细胞体外成熟的影响第84页
  2.4 不同激素配比对卵母细胞体外成熟的影响第84-85页
  2.5 生长因子对卵母细胞体外成熟的影响第85页
 3. 讨论第85-87页
  3.1 不同季节采集的屠宰山羊卵巢卵母细胞体外成熟比较第85-86页
  3.2 不同温度运输屠宰山羊卵巢对卵母细胞体外成熟的影响第86页
  3.3 卵母细胞大小对卵母细胞体外成熟的影响第86页
  3.4 不同激素配比对卵母细胞体外成熟的影响第86页
  3.5 生长因子对卵母细胞体外成熟的影响第86-87页
 4. 结论第87页
 参考文献第87-89页
第四章 山羊卵母细胞孤雌激活第89-101页
 1. 材料和方法第90-91页
  1.1 屠宰山羊卵巢的采集第90页
  1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集第90页
  1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟第90页
  1.4 成熟卵母细胞的激活第90-91页
 2. 结果第91-94页
  2.1 不同浓度的乙醇对山羊卵母细胞的激活比较第91-92页
  2.2 Sr~(2+)-CB在不同激活时间对山羊卵母细胞的激活比较第92页
  2.3 6-DMAP和6-DMAP-CB不同激活时间对山羊卵母细胞的激活第92-93页
  2.4 6-DMAP对电激活山羊卵母细胞的激活影响第93-94页
  2.5 温度对山羊卵母细胞的激活第94页
 3. 讨论第94-96页
  3.1 乙醇对山羊卵母细胞的激活第94页
  3.2 Sr~(2+)-CB对山羊卵母细胞的激活第94-95页
  3.3 6-DMAP和6-DMAP-CB对山羊卵母细胞的激活第95页
  3.4 6-DMAP对电激活山羊卵母细胞发育的影响第95-96页
  3.5 温度对山羊卵母细胞的激活第96页
 4. 结论第96页
 参考文献第96-101页
第五章 山羊早期胚胎体外培养第101-107页
 1. 材料和方法第102-103页
  1.1 屠宰山羊卵巢的采集第102页
  1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集第102页
  1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟第102页
  1.4 成熟卵母细胞的激活第102页
  1.5 孤雌激活山羊胚胎的体外培养第102-103页
 2. 结果第103-104页
  2.1 不同培养液培养山羊孤雌激活胚胎的比较第103页
  2.2 mCR1中添加不同蛋白或氨基酸培养山羊孤雌激活胚胎的比较第103-104页
 3. 讨论第104-105页
  3.1 不同培养液体外培养山羊孤雌激活胚胎的比较第104页
  3.2 mCR1中添加不同蛋白或氨基酸培养山羊孤雌激活胚胎的比较第104-105页
 4. 结论第105页
 参考文献第105-107页
第六章 山羊体细胞的分离和培养第107-113页
 1. 材料和方法第107-108页
  1.1 山羊颗粒细胞和卵丘细胞的采集和体外培养第107-108页
  1.2 山羊皮肤成纤维细胞的采集和体外培养第108页
  1.3 培养细胞的传代第108页
  1.4 培养细胞的冷冻保存第108页
 2. 结果第108-109页
 3. 讨论第109-110页
 4. 结论第110页
 参考文献第110-113页
第七章 山羊成年体细胞核移植第113-125页
 1. 材料和方法第114-116页
  1.1 屠宰山羊卵巢的采集第114页
  1.2 屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集第114-115页
  1.3 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟第115页
  1.4 成熟卵母细胞的去核第115页
  1.5 供体细胞的准备第115页
  1.6 核移植第115页
  1.7 克隆胚胎的激活第115-116页
  1.8 克隆胚胎的体外培养第116页
  1.9 克隆胚胎的外科手术移植第116页
 2. 结果第116-120页
  2.1 去注核的效率第116页
  2.2 Sr~(2+)-CB激活克隆胚胎的卵裂率和胚胎移植结果第116-117页
  2.3 I-6DMAP激活不同细胞克隆胚胎的卵裂率和发育率第117页
  2.4 颗粒细胞和皮肤成纤维细胞克隆胚胎的移植结果第117-120页
 3. 讨论第120-121页
  3.1 不同激活方法对体细胞核移植胚胎发育的影响第120-121页
  3.2 不同类型供体体细胞核移植对其进一步发育能力的影响第121页
  3.3 体细胞核移植胚胎的移植结果第121页
 4. 结论第121-122页
 参考文献第122-125页
第八章 山羊核移植胚胎早期形态第125-133页
 1. 材料和方法第125-126页
  1.1 山羊体细胞克隆胚胎的生产第125-126页
  1.2 山羊体细胞克隆胚胎的固定和染色第126页
  1.3 山羊孤雌激活胚胎的固定和染色第126页
 2. 结果第126-129页
 3. 讨论第129-130页
 4. 结论第130页
 参考文献第130-133页
第九章 体细胞克隆山羊微卫星DNA分析第133-136页
 1. 材料和方法第133-135页
  1.1 微卫星DNA引物合成第133-134页
  1.2 山羊不同个体总DNA的提取第134页
  1.3 不同个体DNA的微卫星DNA PCR第134-135页
  1.4 微卫星DNA PCR产物的聚丙烯酰胺测序胶电泳第135页
  1.5 微卫星DNA PCR产物电泳板染色第135页
 2. 结果第135-136页
 3. 讨论第136页
 4. 结论第136页
参考文献第136-139页
Abstract第139-143页
作者简介第143页

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