| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-14页 |
| ·研究目的与意义 | 第9-10页 |
| ·蜱功能基因的国内外研究现状 | 第10-13页 |
| ·蜱功能基因的分布 | 第10-11页 |
| ·与蜱唾液腺有关的功能性抗原 | 第11-12页 |
| ·与微小牛蜱免疫相关的功能性分子 | 第12-13页 |
| ·与长角血蜱有关的功能性抗原分子 | 第13页 |
| ·研究的内容和方法 | 第13-14页 |
| 第二章 文库的免疫学筛选和基因的克隆 | 第14-23页 |
| ·材料和方法 | 第14-19页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·试剂与实验用品 | 第14页 |
| ·仪器与设备 | 第14-15页 |
| ·阳性血清的制备 | 第15-16页 |
| ·cDNA文库的免疫学筛选 | 第16-17页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第17-19页 |
| ·结果 | 第19-20页 |
| ·阳性克隆的筛选结果 | 第19-20页 |
| ·阳性克隆的测序结果 | 第20页 |
| ·讨论 | 第20-23页 |
| 第三章 阳性克隆原核表达及反应原性的初步鉴定 | 第23-32页 |
| ·材料和方法 | 第23-28页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·λSCREEN空白环形载体的制备 | 第24页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第24-25页 |
| ·表达产物的蛋白质电泳以及目的蛋白的检测 | 第25-28页 |
| ·结果 | 第28-29页 |
| ·重组质粒表达的蛋白质电泳结果 | 第28-29页 |
| ·免疫印迹结果 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| 第四章 新基因 HqLA-2 的克隆与测序 | 第32-39页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·HqLA-2 的克隆引物 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·青海血蜱幼蜱总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·HqLA-2 之5’一端的扩增 | 第34-35页 |
| ·RACE产物的克隆 | 第35页 |
| ·序列拼接 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-37页 |
| ·所提取总RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·目的基因5’端的克隆结果 | 第36页 |
| ·目的基因序列的拼接 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·PCR特异性的改进 | 第37页 |
| ·RNA质量对RACE方法的影响 | 第37页 |
| ·目的片段克隆条件的优化 | 第37-38页 |
| ·HqLA—2 基因片段的选取 | 第38-39页 |
| 第五章 全文结论 | 第39-40页 |
| ·进行cDNA表达文库筛选并获得新基因 | 第39页 |
| ·对5 个基因进行了表达 | 第39页 |
| ·采用RACE方法获得了基因HqLA-2 的完整开放阅读框 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-70页 |
| 附录1 获取的序列号 | 第45-47页 |
| 附录2 HqLA-1 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第47-49页 |
| 附录3 HqLA-2 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第49-51页 |
| 附录4 HqLA-3 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第51-54页 |
| 附录5 HqLA-4 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第54-56页 |
| 附录6 HqLA-5 登陆 GenBank/NCBI 记录情况.. | 第56-58页 |
| 附录7 HqLA-6 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第58-61页 |
| 附录8 HqLA-7 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第61-63页 |
| 附录9 HqLA-8 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第63-65页 |
| 附录10 HqLA-9 登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第65-68页 |
| 附录11 HqLA-2 全长基因登陆 GenBank/NCBI 记录情况 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
